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乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,是女性最常见的恶性肿瘤之一。越来越多的研究表明核糖体蛋白的异常表达与乳腺癌的发生发展息息相关。自噬在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的调控作用。已有研究报道抑制核糖体的合成和核糖体蛋白的缺失会诱导乳腺癌细胞自噬。通过免疫组化分析我们发现核糖体蛋白S27-like(RPS27L)在乳腺癌组织中的表达比正常乳腺组织中的表达下降,这提示RPS27L的表达下调可能在乳腺癌的发生过程中发挥作用。我们以前的研究结果表明RPS27L不仅是一个p53的生理调节物,而且具有抑制基因组不稳定性和肿瘤发生的生理功能,但是RPS27L在肿瘤发生过程中是否具有p53非依赖的功能,以及RPS27L在自噬发生过程中是否发挥作用还不清楚。为了明确RPS27L在自噬中的调控作用和寻找p53非依赖的RPS27L功能,我们选择了两株p53突变的乳腺癌细胞MB231和SK-BR3。运用siRNA干扰技术在这两株细胞中下调RPS27L,通过免疫印迹、免疫荧光和电镜技术检测我们发现敲降RPS27L能明显诱导细胞自噬的发生。已有研究表明mTORC1能负调控自噬,我们用免疫印迹实验和体外激酶实验证明敲降RPS27L选择性地抑制了 mTORC1的活性,对mTORC2的活性没有影响。同时,在正常MEF细胞中,敲除Rps271同样引起了细胞自噬和mTORC1活性的下降。由于DEPTOR是mTOR的抑制因子,通过免疫印迹实验和qRT-PCR实验,我们发现敲降RPS27L显著上调DEPTOR的蛋白表达,但对DEPTOR的mRNA水平仅有轻微上调。我们进一步用蛋白合成抑制剂放线菌酮(CHX)处理细胞,发现敲降RPS27L细胞中DEPTOR的蛋白降解半衰期显著延长。我们以前的研究表明DEPTOR是β-TrCP的底物,我们进一步研究发现敲降RPS27L细胞中β-TrCP的蛋白水平明显下降,而mRNA的水平无改变,同时其蛋白降解半衰期缩短。说明敲降RPS27L通过促进β-TrCP的降解,使其底物DEPTOR的降解受抑制,导致DEPTOR的累积从而下调mTORC1的活性诱导自噬的发生。利用自噬抑制剂氯喹(CQ)和Bafilomycin A1(Baf-A1)抑制RPS27L敲降引起的自噬显著促进细胞凋亡,使细胞活力明显下降。这提示敲降RPS27L诱导乳腺癌细胞发生保护性自噬。综上所述,我们的研究结果表明RPS27L的表达在乳腺癌组织中下调,敲降RPS27L通过下调β-TrCP促进DEPTOR的积累,进而抑制mTORC1的活性,引起细胞自噬,最终促进乳腺癌细胞的存活。这些研究结果表明RPS27L表达下降可能对乳腺癌的发生具有促进作用,在RPS27L低表达的乳腺癌患者的治疗中抑制细胞自噬的发生,可能提高乳腺癌的治疗效果。因此,我们的研究为乳腺癌患者的个性化治疗提供了新的方向。