根皮素单独作用以及联合3-MA对CAOV3细胞增殖和凋亡的影响

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目的观察不同浓度根皮素对CAOV3细胞增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制;观察根皮素联合自噬抑制剂3-MA对CAOV3细胞增殖、凋亡的影响;在体外细胞实验方面为根皮素联合自噬抑制剂用药提供可靠的实验数据。方法MTT法检测不同浓度的根皮素作用CAOV3细胞后其活力的变化;用流式细胞技术检测不同浓度根皮素作用CAOV3细胞后其凋亡率的变化;Western blot检测不同浓度根皮素作用CAOV3细胞后p53和Bax蛋白变化情况及MAPK信号传导通路蛋白p38磷酸化情况。Western blot检测根皮素单独及联合3-MA作用于CAOV3细胞后自噬标记性蛋白LC3B表达情况;MTT法检测根皮素单独及联合3-MA对CAOV3细胞增殖的抑制作用;用流式细胞技术检测根皮素单独及联合3-MA作用CAOV3细胞后其凋亡率的变化。结果1.根皮素能够抑制CAOV3细胞生长且呈剂量-时间依赖性,与对照组相比均具有统计学意义(P<0.05);2.随着根皮素给药浓度的递增CAOV3细胞凋亡率增高(P<0.05),凋亡相关蛋白p53和Bax表达量也随着增加(P<0.05);3.不同浓度根皮素作用CAOV3细胞结果显示,随着剂量增加,可见p-p38蛋白表达逐渐增高(P<0.05),而p38蛋白表达变化不明显,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);4.根皮素抑制CAOV3细胞生长过程中,自噬系统被激活,与对照组比较可见自噬标记蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值升高(P<0.05);根皮素联合自噬抑制剂3-MA给药后LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值降低,自噬得到抑制(P<0.05)。5.根皮素联合自噬抑制剂3-MA共同干预CAOV3细胞与根皮素单独处理组相比,能显著抑制CAOV3细胞生长(P<0.05);CAOV3细胞凋亡率也明显增加(P<0.05)。结论根皮素能够抑制CAOV3细胞增殖而且呈剂量-时间依赖性,同时诱导CAOV3细胞发生凋亡;其凋亡机制可能通过磷酸化p38蛋白参与调控。根皮素作用CAOV3细胞过程中自噬系统被激活,联合3-MA抑制自噬后能够显著增加根皮素对CAOV3细胞的抑制率和凋亡率,在体外细胞实验方面为根皮素联合3-MA用药提供可靠的实验数据。
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