小鼠多倍体胚胎发育的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzdlily_5000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察小鼠多倍体胚胎植入后发育形态学特征,结合囊胚基因表达分析,阐述小鼠多倍体胚胎的发育潜能,为小鼠多倍体胚胎的发育和研究提供实验数据,也为重复基因组的基因表达水平提供最为基础和重要的数据。  方法:制作多倍体胚胎并进行胚胎移植,收集E5.5-8.5的着床胚,通过切片观察多倍体E5.5-8.5着床胚的胚层分化形态结构特征;使用4个独立软件程序geNorm、NormFinder、比较delta-Ct法和RefFinder分析内参基因的稳定性,选出在二倍体与多倍体植入前胚胎中通用的最稳定的内参基因,并分析和阐述多倍体中候选内参基因的表达模式。应用Real-time qPCR技术检测多倍体胚胎与聚合多倍体胚胎囊胚期发育相关基因的表达,包括Oct4、Nanog、Sox2、Gata4、Gata6、 Cdx2、Wnt9a和Fgf4。  结果:  1、观察着床胚的发育形态学以及对应发育时程,ICR小鼠4N胚胎未能发育至E9.5,且发育时程明显较二倍体延迟,六倍体胚胎植入后发育停滞于E5.5。ICR小鼠聚合四倍体E5.5-8.5的发育情况基本与二倍体一致,未见发育延迟现象。聚合六倍体E5.5-8.5发育时程延迟。  2、除了1-cell阶段,大多数内参基因在多倍体中表达水平比二倍体胚胎中高。但增加程度与倍性不成比例;在囊胚期不同倍性的胚胎之间内参基因表达差异不显著。  3、在所有样本组中,最稳定的内参基因是Ubc、Ppia和Pgk1,最不稳定的是Tbp、Gapdh和β-actin。  4、检测发育关键基因在小鼠多倍体和聚合多倍体囊胚中的表达差异,结果显示在多倍体中Oct4、Nano和Fgf4变化不显著;Sox2、Gata4和Gata6达下降,Cdx和Wnt9a表达上升;聚合多倍体胚胎中Sox2、Gata6和Fgf4表达回升,Wnt9a表达回降,表达水平更接近于二倍体。而Cdx2表达继续上升,表明多倍体胚胎可能更倾向于滋养外胚层方向发育。  结论:  1、ICR小鼠多倍体胚胎发育明显异常,四倍体发育时程延迟,六倍体发育停滞于E5.5时期;E5.5-8.5 ICR小鼠聚合后四倍体发育形态与时程基本与二倍体一致,聚合六倍体发育时程延迟。  2、通用于植入前小鼠二倍体和多倍体胚胎的最稳定参考基因是Ubc、Ppia和Pgk1。  3、胚胎聚合改善了小鼠多倍体囊胚关键发育基因的表达,如Sox2、Gata6、Wnt9a和Fgf4等。  
其他文献
去年8月,北京正值酷暑,而越南的河内更热。滚滚热浪,从日出到日落,即使是夜晚漫步在街头,也是汗水裹身。这是我第三次访问越南。第一次是1963年4月,第二次是1970 In August
概念的分类理论和概念的界定是传统逻辑概念论的重要内容,目的是为了知道人们能够明确概念,以便对以此概念为基础的命题和推理作出正确的逻辑分析和运用.而体育概念的划分和
体育精神是对体育实践活动起着导向作用,并规定着体育文化模式的选择.体育精神作为一种具有能动作用的意识,是体育行为的动力源泉,是一种心理资源.提高学生的体育精神是适应
在我国高校的课堂上,足球这项运动的重视程度还远远不够.针对足球展开的训练在高校当中不是特别广泛.这篇文章我们分析了高校的足球教学与训练的不足之处,并对其进行了分析,
谢顾问:我在从事新闻写作的同时,也练习写一些评论、杂文、散文、诗歌。可有人说,写作要专攻一门,不能四面开花,否则难以成才。我到底应当怎么做?37031部队范刚常范刚常同志:写作是
体育舞蹈也称“国际标准交谊舞”,是一种通过肢体表演展示技巧而表达内心情感,使观众产生艺术审美体验的体育运动,也是舞蹈文化的重要组成部分.一场优秀的体育舞蹈表演,不仅
采用同时蒸馏萃取法提取烟叶中的挥发性成分,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分离测定,通过谱库检索和匹配度定性结合色谱保留指数方法鉴定烟叶中挥发性成分,并引入离子阱二级
本文主要采用文献资料法、专家访谈法,针对传统普通高校学生公共体育课程效果评价中存在的不足以及在应用过程中出现的问题进行分析,并依据“健康第一”的体育教育思想提出高