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目的: 探讨miR-375对其下游潜在靶点Sp1的靶向作用,及其调控子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的分子机制,以期为子宫内膜癌的临床防治提供新思路。 方法: (1)选取20例子宫内膜癌组织及相应癌旁组织,标本均来源于国际和平妇幼保健院,采用RT-PCR检测组织中miR-375的表达; (2)选取上述组织,采用Western blot检测其中蛋白Sp1的表达; (3)选取子宫内膜癌细胞系HEC-1A,分别转染miR-375mimic及control mimic,采用RT-PCR检测细胞中miR-375表达; (4)选取子宫内膜癌细胞系HEC-1A,分别转染miR-375mimic及control mimic,采用western blot检测Sp1蛋白表达; (5)选取子宫内膜癌细胞系HEC-1A,分别转染miR-375mimic及control mimic,采用MTT法检测细胞增殖; (6)选取子宫内膜癌细胞系HEC-1A,分别转染miR-375mimic及control mimic,采用流式细胞仪检测细胞凋亡; (7)分别将野生型Sp13’-UTR质粒(Sp1-wt)和突变型Sp13’-UTR质粒(Sp1-Mut)与miR-375mimic或control mimic共转染至子宫内膜癌细胞系HEC-1A,采用双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性。 结果: (1)与癌旁组织相比较,子宫内膜癌组织中miR-375表达明显降低(P<0.05); (2)与癌旁组织相比较,子宫内膜癌组织中Sp1蛋白表达明显增高(P<0.05)。 (3)与转染control mimic相比较,转染miR-375mimic可使子宫内膜癌细胞HEC-1A中miR-375表达增高(P<0.05); (4)与转染control mimic相比较,转染miR-375mimic可使子宫内膜癌细胞HEC-1A中Sp1蛋白表达降低(P<0.05); (5)与转染control mimic相比较,转染miR-375mimic可使子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖活性显著降低(P<0.01); (6)与转染control mimic相比较,转染miR-375mimic可使子宫内膜癌细胞HEC-1A总凋亡比例显著增高(P<0.05); (7)与转染control mimic相比较,共转染miR-375mimic与Sp1-wt可使子宫内膜癌细胞HEC-1A荧光素酶活性降低(P<0.05),而共转染miR-375mimic与Sp1-Mut则子宫内膜癌细胞HEC-1A荧光素酶活性无显著性变化(P>0.05)。 结论: miR-375可通过靶向Sp1实现对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的调控。