[目 的]骨质疏松症的发病机制目前尚不明确。但有大量研究表明,骨质疏松症的发生与骨内血管的减少有着密切的关系。虽然骨髓间充质干细胞在骨质疏松症的治疗中有着巨大的潜力,但其治疗骨质疏松症的具体机制是否与促进骨内血管生成作用有关仍需进一步验证。本研究通过双侧卵巢切除术、单侧后肢股动脉结扎术构建了去势骨质疏松以及后肢缺血的小鼠动物模型,观察骨髓间充质干细胞对去势小鼠骨量的影响,同时也观察了骨内血管的变化情况。进一步探究其治疗骨质疏松症具体机制,为骨髓间充质干细胞的临床应用提供理论依据,同时也为骨质疏松症的临床治疗提供新的思路。[方法]1、通过贴壁培养法培养8周龄小鼠骨髓间充质干细胞,并进行种植传代,利用成骨、成脂及成软骨诱导分化以及流式细胞术对其进行鉴定。2、取8周龄健康C57BL/6雌性小鼠60只,采用双侧卵巢切除术及单侧股动脉结扎构建去势骨质疏松及单侧后肢缺血动物模型。随机分为5组,分别为:A组:假手术组（Sham组）、B组:双侧卵巢切除+溶剂对照组（OVX+PBS处理组）、C组:双侧卵巢切除+细胞处理组（OVX+MSCT组）、D组:双侧卵巢切除+单侧后肢股动脉结扎+溶剂对照组（OVX+FAL+PBS处理组）、E组:双侧卵巢切除+单侧后肢股动脉结扎+细胞处理组（OVX+FAL+MSCT组）。在双侧卵巢切除术后1周、3周,即股动脉结扎术后1天、2周通过尾静脉注射将骨髓间充质干细胞移植到已构建的动物模型中,剂量为1×106个细胞/只。3、在双侧卵巢切除术后第4周时处死小鼠,完整分离小鼠股骨,利用Micro-CT扫描并进行三维重建及皮质骨与松质骨的骨小梁参数分析,观察去势小鼠的骨量变化,以此评估MSCT对去势小鼠骨量的影响。4、在不同时间点（MSCT后1天、3天、7天、14天、21天）监测其后肢血流情况,评估其后肢血管的恢复情况。同时,在不同时间点（MSCT后1天、14天、28天）对小鼠股骨骨内血管进行造影,并通过Micro-CT扫描进一步观察骨内血管生成情况。5、将已完成Micro-CT扫描的小鼠股骨样本进行HE染色、Masson染色、油红O染色以及Trap染色,以此检测去势小鼠骨组织的变化以及MSCT后小鼠骨组织的变化情况。[结 果]1、流式细胞术检测结果表明所提取细胞的表面标志物CD29、Sca-1、CD44高表达,而表面标志物CD11b、CD45、CD117低表达。符合BMSCs的表面标志物表达规律,同时也表现出良好的成骨、成脂以及成软骨能力。2、对各组小鼠的股骨Micro-CT及骨量分析结果显示:对于Tb.BT/TV、Tb.N及Tb.BMD等松质骨参数,OVX组相较于Sham组明显降低（P<0.05）,而且MSCT组相较于OVX组明显增高（P<0.05）。而对于Ct.Ar、Ct.Th以及Ct.BMD等皮质骨参数,三组未出现明显差异（P>0.05）。3、对各组小鼠股骨的病理组织切片分析的结果显示:去势小鼠的骨量丢失,骨组织内胶原纤维排列紊乱,同时也伴随着骨内破骨细胞和脂肪组织的增多,而对于MSCT组的小鼠来说,其骨组织受损程度明显减轻（HE染色）;而且骨组织胶原含量下降程度减轻（Masson染色）、破骨细胞明显减少（Trap染色）;同时,骨组织内脂肪含量明显减少（油红O染色）。4、对于去势后股动脉结扎术的小鼠,双侧股骨均出现了骨量减少和骨小梁连续性的破坏,但结扎侧更为严重。不论是OVX组还是MSCT组,结扎侧Tb.BT/TV、Tb.N以及Tb.BMD均低于未结扎侧（P<0.05）;同时,MSCT组的骨组织参数数值均高于OVX组。而对于皮质骨参数,无论是结扎侧或是未结扎侧,Ct.Ar、Ct.Th以及Ct.BMD均无明显变化,同时这些参数在MSCT组和OVX组组间也未出现明显差异（P>0.05）。5、激光散斑血流仪检测结果显示:在股动脉结扎后,小鼠结扎侧后肢血流量较未结扎侧明显下降。MSCT组小鼠后肢血流量相较于OVX组明显增加（P<0.05）;同时,OVX组后肢血流量也出现缓慢增加的趋势。而对于未结扎侧,MSCT组与PBS组后肢血流量未出现明显差异（P>0.05）。6、骨内血管造影Micro-CT扫描三维重建结果显示:对于结扎侧而言,经过MSCT后,小鼠后肢血管数量明显高于对照组（P<0.05）;对于未结扎侧,小鼠的后肢血管数量随时间的增加出现缓慢降低的趋势,而MSCT组小鼠则呈现缓慢增加的趋势,在第28天时,二者出现明显差异（P<0.05）。[结论]1、MSCT可以有效的预防去势小鼠的骨量丢失;2、去势小鼠的骨量丢失伴随着骨内血管的减少,阻断骨组织血流可以加重去势小鼠的骨量丢失程度;3、MSCT增加了股动脉结扎术后去势小鼠的骨内血流量,减轻了股动脉结扎术后去势小鼠骨量的丢失程度;4、骨髓间充质干细胞可以通过增加骨内血管数量,恢复骨组织内血流来减轻骨量丢失程度,从而达到保护骨组织的目的。