3种固氮蓝藻对新磺酰脲类除草剂的耐药性差异及其机理的研究

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磺酰脲类除草剂作为一类高选择性、广谱、低毒的超高效除草剂在世界范围内已得到了广泛的应用,但是对于其作用机理的研究却还存在着较大的空白,而且由于抗磺酰脲类除草剂杂草种类的不断出现,迫切需要明确了解其作用机理。本文以满江红鱼腥藻、固氮鱼腥藻及水华鱼腥藻为代表,利用环境毒理学的研究手段,通过研究3种固氮蓝藻对2种磺酰脲类除草剂---单嘧磺隆、单嘧磺酯的耐药性差异来揭示对磺酰脲类除草剂产生抗药性和耐药性的机理。不同种类的的固氮蓝藻对单嘧磺隆、单嘧磺酯不同浓度的敏感性不同。在低浓度(0.010.001mg/L)的2种除草剂的作用下,3种固氮蓝藻的生长没有受到明显的影响,而在高浓度下(10100mg/L),固氮蓝藻藻细胞在形态上出现受损症状,同时生长速率也受到明显的抑制。120h时,满江红鱼腥藻,水华鱼腥藻及固氮鱼腥藻的EC50值分别为3.172, 3.654及3.377mg/L。在10%最佳乙炔浓度下,3种固氮蓝藻固氮酶对单嘧磺隆、单嘧磺酯表现出了不同的耐受性,其中水华鱼腥藻固氮酶活性最易受到除草剂的影响。浓度小于0.1mg/mL的单嘧磺隆不对3种固氮蓝藻的固氮酶产生明显影响,但当浓度大于0.1mg/mL时,随着浓度的升高3种固氮蓝藻的固氮酶活性明显受到抑制。离体和活体条件下测得的的ALS酶活性都表明3种固氮蓝藻ALS酶对单嘧磺隆、单嘧磺酯表现出了不同的耐受能力。3种固氮蓝藻ALS酶对单嘧磺隆的耐受能力为:固氮鱼腥藻EC50=101.3 mg/L>满江红鱼腥藻EC50= 65.2 mg/L>水华鱼腥藻EC50=3.322 mg/L;对单嘧磺酯的耐受能力为:满江红鱼腥藻EC50=613.8 mg/L>固氮鱼腥藻EC50=106.8 mg/L>水华鱼腥藻EC50=3.70 mg/L。在受试的3种固氮蓝藻中,水华鱼腥藻的耐受能力最差。在获得3种固氮蓝藻的ALS部分基因并对其进行分析比较后的结果表明水华鱼腥藻的ALS酶与固氮鱼腥藻及满江红鱼腥藻的ALS酶存在多个位点的差异;系统进化树分析也表明水华鱼腥藻与另2种固氮蓝藻亲缘性更远。这也揭示了耐药性的差异是由于ALS酶的差异造成的, ALS基因编码的氨基酸序列差异是导致不同耐药性的根源。
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