大熊猫是中国特有的珍稀濒危哺乳类动物,是我国的“国宝”。有研究表明表明毛孢子菌属是大熊猫表皮真菌的优势菌属,可引发局部感染和深部感染。本文旨在研究大熊猫源毛孢子菌的种间鉴定、基因分型、形态发育、致病性和筛选有效抗真菌药物,为有效防治大熊猫毛孢子菌病提供参考。(1)本研究通过对29株毛孢子菌的ITS、D1/D2和IGS1序列进行PCR扩增、序列测定和系统发育分析进行种间鉴定和基因分型;通过铜环培养法观察其形态发育过程。结果表明:29株毛孢子菌通过分子生物学鉴定被鉴定为11个种,包括:Trichosporon laibachii 4株、Trichosporon gracile 1株、Trichosporon brassicae1株、Trichosporon domesticum 1株、Trichosporon guehoae 3株、Trichosporon asteroides 5株、Trichosporon jirovecii 5株、Trichosporon cutaneum 1株、Trichosporon shinodae 1株、Trichosporon middelhovenii 3株以及Trichosporon monilliforme 4株,其中T.jirovecii和T.asteroides是优势菌种,各占17.2%,并首次于动物体表分离到T.middelhovenii和T.shinodae;发现4株T.laibachii(JYZ3252、JYZ921、JYZ321和JYZ912)和1株T.monilliforme(JYZ372)为新的基因型,T.jirovecii是基因1型,T.asteroides与1株播散性毛孢子菌病病原为同一基因型。不同种的毛孢子菌形态发育过程明显不同且多数毛孢子菌有典型特征,例如T.gracile菌丝间隔分化和T.shinodae发育过程中短粗的菌丝等,这些差别可作为种间鉴定的重要依据。(2)用皮肤涂擦,腹腔注射和皮内注射三种方式人工感染小鼠,取肝脏和皮肤进行病理学分析。致病性研究表明:T.cutaneum,T.laibachii,T.asteroides,T.brassicae,T.guehoae,T.middelhovenii和T.shinodae都对小鼠的肝脏和皮肤造成损伤,致病性较强;T.asteroides致病性最强,可造成侵袭性感染;不同种毛孢子菌感染肝脏和皮肤的病理特征基本相同,多造成肝细胞坏死,肝细胞间隙增大或肝细胞肿胀;造成皮肤淋巴细胞浸润、角质层增厚,被感染组织有较强的出血倾向。(3)使用丹麦Rosco纸片扩散法,选择9种抗真菌药(伏立康唑、酮康唑、克霉唑、咪康唑、氟康唑、两性霉素B、特比萘芬、5-氟胞嘧啶和伊曲康唑)对29株毛孢子菌进行药敏试验。药敏试验结果表明:伏立康唑对毛孢子菌活性最强,特比萘芬活性较差,氟胞嘧啶无活性,毛孢子菌耐药性有株间差异。T.shinodae耐药性较强,该菌对特比萘芬和氟胞嘧啶耐药,对氟康唑和两性霉素B中度敏感,其余大熊猫源毛孢子菌耐药性不强。结论:29株大熊猫源体表毛孢子菌被鉴定为11个种,4株T.laibachii和1株T.monilliforme为新的基因型;不同种毛孢子菌的形态发育过程不同,是形态学鉴定的重要依据;T.cutaneum,T.laibachii,T.asteroides,T.brassicae,T.guehoae,T.middelhovenii和T.shinodae致病性较强;不同种毛孢子菌感染的肝脏和皮肤的病理特征基本相同,被感染组织有较强的出血倾向;大熊猫源毛孢子菌对伏立康唑最敏感,且毛孢子菌耐药性有株间差异。T.shinodae耐药性较强,其余大熊猫源毛孢子菌耐药性较弱。