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目的检测热休克蛋白-60(HSP60)在胃癌组织及细胞系中的表达及其与肿瘤微血管生成的关系,初步探讨其在胃癌新生血管生成的作用机理及临床意义,并评价其在胃癌发生发展中的价值。方法:1.应用免疫组织化学SP法检测HSP60蛋白在85例胃癌组织及35例癌旁正常胃组织中的分布及表达情况,探讨其与胃癌临床病理特点关系。2.应用免疫组织化学SP法通过测定CD34蛋白来检测微血管密度(microvesseldensity, MVD)在85例胃癌组织及35例癌旁正常组织分布情况,探讨其与胃癌临床病理特点的关系。并应用spearman秩相关检验,检验HSP60和MVD表达间的相关性。3.应用实时定量PCR法检测HSP60在20例胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中的表达,证实HSP60的表达在癌组织与正常组织间存在差异。4.应用实时定量PCR检测胃癌细胞系AGS、BGC-823、SGC-7901、MKN-45、 MKN-28和HGC-27中HSP60的表达。5.应用ELISA法对53例胃癌及46例健康体检者血浆标本进行检测,比较不同组间HSP60表达水平的差异,运用ROC曲线评估HSP60在胃癌早期诊断中的价值,探讨HSP60在胃癌早期诊断及临床应用中的价值。结果1.免疫组化染色结果显示,HSP60蛋白在85例胃癌患者的胃癌组织中的阳性表达率达70.5882%(60/85),而35例癌旁正常胃组织中无表达(0/35),二者有显著的统计学差异(P<0.01)。HSP60的阳性表达与胃癌患者的肿瘤大小、分化程度、浸润程度相关(P<0.05),而与年龄、性别无统计学差异(P>0.05)。2.MVD在胃癌组织中的阳性表达率达62.3529%(60/85),而癌旁正常胃组织中表达为低值,二者有显著的统计学差异(P<0.01)。HSP60的阳性表达与胃癌患者的肿瘤大小、分化程度、浸润程度显著相关(P<0.05),而与年龄、性别无统计学差异(P>0.05)3.Spearman秩相关检验分析,HSP60蛋白和MVD表达具有显著相关性(r=0.404,P<0.001)。4.实时定量PCR法结果显示,HSP60蛋白在20例胃癌患者的胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常胃组织中无表达,二者有显著的统计学差异(P<0.01)。5. HSP60mRNA及在胃癌细胞系AGS、BGC-823、SGC-7901、MKN-45、MKN-28和HGC-27中均高表达,各细胞系之间无差异。显著高于正常组织对照(P<0.01)。6.胃癌组血浆中HSP60(154.8pg/ml)表达水平均显著高于健康对照组(67.48pg/ml)(P<0.001)。HSP60诊断的ROC曲线AUC为0.923,同时ROC曲线确定HSP60的诊断临界值为112.4,其诊断胃癌的敏感度为73.5%,特异度为93.5%,从而证实HSP60的应用有助于胃癌的早期诊断结论:HSP60是HSPs家族的一个重要成员,其在人类多种肿瘤均呈高表达。热休克蛋白作为一种重要的物质参与了调控肿瘤的增殖与凋亡。本研究发现HSP60在胃癌组织比正常胃粘膜组织呈明显升高趋势,且与胃癌患者的肿瘤大小、分化程度、浸润程度相关。提示HSP60高表达与早期胃癌的发生密切相关,检测HSP60对早期胃癌的诊断有参考价值。近年来对肿瘤血管生成的研究表明,血管生成在实体肿瘤的恶变、生长、转移等方面起至关重要的作用,肿瘤生长所形成的血管范围直接与肿瘤转移有关,而肿瘤的微血管密度(MVD)定量地反映肿瘤的血管形成。而研究同样表明,MVD在早期胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,二者间差异具有统计学意义。应用相关分析,在胃癌组织中HSP60蛋白和MVD的具有显著相关性。胃癌组织中HSP60表达水平明显升高,并且与微血管生成密切相关密切相关。因此在临床中通过联合检测HSP60蛋白和MVD的含量,作为早期胃癌诊断及评估其预后的重要参考指标之一,并为胃癌的靶向治疗提供新的方向。通过在胃癌肿瘤标志物的研究,提示HSP60在胃癌早期诊断中有一定的优势,具有潜在的临床应用价值。