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目的:观察神经干细胞(NSCs)与40℃热处理嗅鞘细胞(OECs)联合移植治疗大鼠脊髓损伤(SCI)的疗效,为今后的治疗策略提供参考。方法:取新生大鼠嗅球和大脑皮质,分别用实验室培养嗅鞘细胞培养方法与神经干细胞培养方法提取嗅鞘细胞与神经干细胞。移植前用溴脱氧尿苷(BrdU)标记神经干细胞,热处理组嗅鞘细胞40℃条件下培养6小时后备用。健康清洁级成年SD大鼠,雌性,200-250g,分为:对照组(n=14)、未热处理组(n=14)、热处理组(n=14)。制作大鼠胸10脊髓半横断损伤模型,术后7天分组移植平衡盐溶液(PBS)、神经干细胞+嗅鞘细胞悬液、神经干细胞+热处理嗅鞘细胞悬液,神经干细胞与嗅鞘细胞比例1:1,总数量为107个。整个实验期间,通过Basso-Beatie-Bresnahan (BBB)评分、爬杆计分和旋转时间测定,对大鼠右下肢运动功能进行检测和比较。移植1天、2周、4周后每组随机选择2只大鼠,将大鼠灌注处死后,分离脊髓组织,石蜡切片。通过苏木精-伊红(HE)染色,观察、分析脊髓组织病理学改变。利用BrdU示踪观察移植的细胞的分布情况。结果:NSCs和热处理OECs联合移植治疗的大鼠,BBB评分结果显著提高,尤其是在移植后2周快速增长,6周后评分结果进入缓慢增长期。对照组、未热处理的BBB评分结果上升趋势缓慢,尤以对照组为甚。热处理组的BBB分数在2周、4周、6周、8周、12周显著高于对照组(P<0.05),未热处理组(P<0.05)。移植后4周、6周爬行计分及旋转时间测定结果表明,热处理组肢体功能恢复结果好于其他组(P<0.05)。热处理组HE染色结果显示脊髓细胞排列整齐,接近正常。BrdU标记结果显示损伤组织区域可发现移植细胞,提示移植细胞参与脊髓损伤修复。结论:1.NSCs联合热预处理OECs治疗脊髓损伤效果优于NSCs联合未热预处理OECs治疗效果。2.经热预处理OECs上清液诱导后,NSCs向神经元分化比例明显高于未热预处理OECs上清液诱导后分化比例。