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目的:探索电刺激治疗面神经损伤的疗效以及可能的分子机制研究。方法:第一部分,在面神经出茎乳孔处截断面神经,成功制作大鼠周围性面瘫模型。在面神经截断术后4小时给予大鼠神经肌肉电刺激,分别观察术后第1、7、14、28天反映面神经功能的各项指标,包括行为学观察(观察大鼠触须摆动和瞬目反射)、神经电生理评价(面瘫侧面神经肌电图)、HE染色邻近损伤处远端面神经纤维,了解受损面神经的损伤和修复情况。运用免疫荧光染色和Western blot的方法,检测与轴突再生有关的蛋白NF200,以及与髓鞘再生有关的蛋白S100B,比较不接受神经肌肉电刺激治疗的大鼠(A组)与接受神经肌肉电刺激治疗大鼠(B组)的面神经轴突再生和再髓鞘化情况,判断电刺激能否促进受损面神经的修复。此外还比较了电刺激治疗缝合截断面神经的大鼠(D组)与缝合截断面神经未给予电刺激的大鼠(C组),术后第1、7、14、28天评价面瘫恢复情况的上述各指标。通过统计学分析,A组与B组比较,C组与D组比较,差别是否有统计学意义(取P<0.05作为差异有统计学意义的标准)。在第二部分中运用qPCR检测mRNA和WesternBlot检测蛋白的方法,分别检测电刺激干预组和未电刺激干预组大鼠在术后第1、7、14、28天触须肌内五种神经营养因子(BDNF,FGF2,IGF1,2,NT4)的表达,通过统计学分析,与正常对照组相比,观察各神经营养因子变化是否有统计学意义(取P<0.05作为差异有统计学意义的标准)。结果:在第一部分中,术后第1天四组面瘫功能未见明显恢复。第7天面神经截断电刺激干预组(B组)和对照组(A组)面神经的功能均未见明显恢复,第14天和第28天电刺激治疗面神经截断组(B组)大鼠面瘫恢复率较面神经截断组(A组)好,差异有统计学意义。面神经截断后缝合电刺激组(D组)与对照组(C组)在第7天,第14天和第28天均有差异。神经电生理结果显示,第1天和第7天面神经截断后电刺激组(B组)和对照组(A组)动作电位均未引出,无差别,第14和28天两组间差异有统计学意义,电刺激组引出率更高;第28天动作电位潜伏期和波幅两组间差异有统计学意义(P<0.05)。缝合后电刺激组(D组)和对照组(C组)面神经损伤后第1天动作电位引出率无差别,在第7、14、28天差异有统计学意义(P<0.05),电刺激组引出率更高;两组在第14天潜伏期差异有统计学意义(P<0.05);波幅在第14天和第28天差别有统计学意义(P<0.05),表明电刺激组面神经功能恢复更好。HE染色第1天和第7天实验组与相应对照组未见明显差别,均表现为损伤远端面神经纤维髓鞘均有不同程度的变薄或缺损,胞内和纤维束见有很多空泡形成,大量神经轴突消失,结构紊乱,不均匀,神经纤维束稀疏,各组的差别不明显。第14天截断神经未电刺激组(A组)面神经纤维束肿胀变形,髓鞘依然缺如,第28天轴突形态各异,正常形态轴突很少,轴突形态不规则,髓鞘未见明显恢复。接受电刺激组(B组)第14天见神经纤维内轴突数量增多,肿胀好转,周围有小的神经束长入,增殖修复神经束,第28天轴突初见形态,只是边缘呈不规则的波浪形,周围髓鞘也有所恢复,缝合神经电刺激干预组和未电刺激组的改变与之相似。电刺激治疗组(B组和D组)损伤远端面神经在第7,14,28天均较未接受电刺激组(A组和C组)神经纤维更为粗大,数量更多,结构更紧密。免疫荧光染色结果显示,截断神经未电刺激组(A组)大鼠各时间点损伤远端神经NF200均为阴性,截断后电刺激组(B组)在第14天可见NF200稍有上调,但与正常对照组相比差别无统计学意义(P>0.05),在第28天NF200荧光染色百分比上调,与正常对照组相比差别有统计学意义(P<0.05)。表明电刺激组的轴突有再生修复的迹象。缝合未电刺激组(C组)大鼠在第1、7、14天邻近损伤远端神经纤维组织内NF200均为阴性,表明轴突生长情况不良,第28天呈表达有所上升,但与正常对照组差别无统计学意义。缝合后电刺激组(D组)在第1、7天神经纤维组织内NF200为阴性,第14天可见NF200表达有所上升,但与正常对照相比差别无统计学意义(P>0.05),在第28天NF200染色阳性,与正常对照组相比差别有统计学意义(P<0.05)。接受电刺激治疗组大鼠邻近面神经截断处远端神经组织在第14天和第28天S100B蛋白表达上调,未接受电刺激治疗的大鼠邻近面神经截断处远端神经组织在各时间点未见S100B蛋白表达上调,表明电刺激可使面神经轴突再生,再髓鞘化。在第二部分中,观察到截断未电刺激组(A组)各时间点神经营养因子无上调,截断后电刺激组(B组)第7天,第14天,第28天BDNF和NT4的mRNA和蛋白表达上调,缝合未电刺激组(C组)第14天,第28天BDNF和NT4的mRNA和蛋白表达上调,缝合后电刺激组(D组)第7天,第14天,第28天脑源性神经营养因子BDNF,成纤维生长因子FGF2,神经营养因子4NT4的mRNA和蛋白表达均上调。电刺激组大鼠触须肌内IGF1mRNA在电刺激治疗后第7天一过性的小幅上调,之后又恢复如常。而蛋白没有相应改变。接受电刺激治疗组IGF2的mRNA和蛋白仅在第1天mRNA有所下降,之后虽然有所波动,但都没发现明显改变。结论:电刺激能促进面神经功能恢复,能促进轴突再生和再髓鞘化,电刺激治疗作用可能与神经肌肉接头处神经营养因子(BDNF、FGF2、NT4)表达上调有关。