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目的:探讨黄芪对巨噬细胞吞噬结核杆菌作用的影响。
方法:用罗文斯坦-琴逊培养基和苏通氏培养基两种方法培养结核杆菌;采用RPMI1640、无菌液体石蜡和淀粉肉汤三类物质刺激小鼠腹腔,使其发生炎症反应从而提取巨噬细胞,并采用台盼蓝染色,瑞氏染色法、非特异性酯酶染色法及氟化钠抑制试验三种方法,以鉴定巨噬细胞并计算纯度、数量及其活性,最后选用RPMI1640灌洗腹腔的方法提取巨噬细胞,在体内实验中选择黄芪多糖进行实验,将浓度为0μg/μl(对照组)及不同浓度的黄芪多糖1.0 ml每天注射小鼠1次,连续7天。在第7天给小鼠腹腔注射密度为1×1010/L的结核杆菌500μL,1h后处死小鼠,取腹腔液离心涂片,经抗酸染色,油镜下计算吞噬率并计算吞噬指数;在体外实验中以浓度为0μg/μl(对照组)及不同浓度的的黄芪多糖及黄芪甲苷100μl与RPMI-1640灌洗小鼠腹腔获得的巨噬细胞及结核杆菌共同孵育,采用荧光定量PCR法检测巨噬细胞对结核杆菌的吞噬能力,并检测上清液中IFN-γ和IL-1β的含量。
结论:黄芪的两种主要成分黄芪多糖及黄芪甲苷均提高巨噬细胞对结核杆菌的吞噬作用,并以黄芪甲苷效果更佳,但它们均具有双相性,当其浓度过高时具有抑制巨噬细胞吞噬结核杆菌的作用。从而为临床治疗结核病提供了理论依据和新的思路。