论文部分内容阅读
目的细胞模型上研究柯里拉京对TLR4信号通路的作用及其机制。方法：脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞造成炎症模型。予以柯里拉京进行干预。CCK8法检测细胞存活率；实时荧光定量聚合酶链反应检测各组TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的mRNA的表达水平；Western blot测定各组TLR4信号通路中各信号分子蛋白的表达；ELISA法检测细胞上清中的IL-10, IL-6;结果：1.CCK8法检测的柯里拉京IC50值是0.25mg/ml;2.柯里拉京干预后,TLR4信号通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的mRNA和蛋白水平,模型组显著高于正常组(p＜0.01),而柯里拉京处理组显著低于模型组(p＜0.01)；3.柯里拉京干预后,TLR4信号通路中产生的促炎因子IL-6, IL-1β,模型组显著高于正常组(p＜0.01),而柯里拉京处理组显著低于模型组(p＜0.01)；结论：在细胞模型上,柯里拉京可通过抑制TLR4信号通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的表达,从而抑制促炎因子IL-6,IL-1β的释放。目的：细胞模型上研究柯里拉京对TLR4-MyD88信号通路的作用及其机制。方法：采用小分子RNA干扰技术沉默TICAM1的表达,脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞造成炎症模型。予以柯里拉京进行干预。实时荧光定量聚合酶链反应检测各组TICAMl的表达,及柯里拉京干预后TLR4, TRAF6, MyD88的mRNA的表达水平；结果：1.实时荧光定量聚合酶链反应检测TICAM1siRNA转染细胞后TICAM1mRNA表达水平,与正常组相比siRNA表达量明显降低(P<0.01);2.柯里拉京干预后,TLR4-MyD88信号通路中TLR4,MyD88, TRAF6的mRNA模型组显著高于正常组(P＜0.01),而柯里拉京处理组显著低于模型组(P＜0.01)；结论：在细胞模型上,柯里拉京可抑制TLR4-MyD88信号通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的表达,目的：动物模型上研究柯里拉京对TLR4信号通路的作用及其机制。方法：脂多糖(LPS)腹腔注射Balb/c雄性小鼠造成脓毒症模型。予以柯里拉京进行干预。HE染色检测小鼠肝,脾,肺,肾,结肠及脑组织的病理改变；实时荧光定量聚合酶链反应检测各组TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的mRNA的表达水平；Western blot测定各组TLR4信号通路中各信号分子蛋白的表达；ELISA法检测细胞上清中的IL-1β,IL-6;结果：1.HE染色病理切片示,模型组小鼠均有不同程度的病理损伤,而柯里拉京处理组,能一定程度上改善各个脏器的炎症,坏死,水肿等情况；2.柯里拉京干预后,TLR4信号通路中TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的mRNA和蛋白水平,模型组显著高于正常组(p<0.01),而柯里拉京处理组显著低于模型组(p<0.01)；3.柯里拉京干预后,TLR4信号通路中产生的促炎因子IL-6,IL-1β,模型组显著高于正常组(p<0.01),而柯里拉京处理组显著低于模型组(p<0.01)；结论：在动物模型上,柯里拉京可通过抑制TLR4信号通路中TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的表达,从而抑制促炎因子IL-6,IL-1β的释放。