背景南极磷虾(Euphausia superba)是一种海洋软甲纲的无脊椎动物，是世界上生物质能最大的物种，因其处在海洋食物链的底端决定其为许多海洋猎食动物（如海豹、鲸等）的主要食物来源。世界上许多国家已经开始进行南极磷虾的捕捞与研究，我国也自2009年12月开始正式对南极磷虾进行捕捞。南极磷虾不仅是南大洋的关键物种，也是地球上储量最丰富且亟待开发利用的渔业资源，同时其体内富含虾青素等类胡萝卜素物质，虾青素酯是南极磷虾甲壳内色素的主要组成成分，因此南极磷虾是天然虾青素的极好来源之一。天然虾青素是一种具有活性羟基酮基团的多烯式类胡萝卜素，分子式为C40H52O4。虾青素是最重要的天然类胡萝卜素之一，是自然界抗氧化性最强的天然分子，此外虾青素还具有多种有益的生理学功能，比如着色功能(在鱼类肌肉、鳞片，鸟类羽毛和蛋黄中等)、增强免疫力功能、预防癌症以及抗紫外线功能等，因此天然虾青素具有多方向的研究价值，在保健品和化妆品制造业都具有广阔的开发与利用前景。目的本文旨在探究对于南极磷虾中虾青素的一系列简捷、高效的提取纯化及日常分析方法，主要利用高效薄层色谱法和常压柱色谱法对虾青素进行分离纯化，并利用薄层扫描和液质联用进行纯度分析，力求高效省时、节约溶剂，以减少剧毒有机溶剂对环境的污染与破坏。方法用脂溶性有机溶剂提取南极磷虾干虾得到红色的南极磷虾油，采用高效薄层色谱法对南极磷虾油中的虾青素类成分进行分离与分析，虾青素类成分包括游离虾青素及各类虾青素酯。利用氢氧化钾的甲醇溶液对虾青素酯进行皂化，使碱与虾青素酯上的脂肪酸结合以释放游离虾青素，皂化完成后浓缩样品，然后立即用硅胶常压柱色谱法对皂化样品进行纯化。收集洗脱下来的每一个色素条带，分别浓缩后再在薄层色谱中对照虾青素标准品鉴定哪一个是游离虾青素的条带，将纯化得到的虾青素浓缩后再分别进行适当的预处理，最后采用高效薄层扫描法与液质联用法分析检验其纯度。结果对提取得到的虾青素酯进行高效薄层色谱分析，主要分离得到三种红色成分，其中游离虾青素的Rf值为0.32,另外两个点的Rf值分别为0.63和0.91，经氢氧化钾的甲醇溶液皂化后样品中游离虾青素的含量由5%±1.0%升高到85%±5.0%，通过常压柱色谱纯化后得到的游离虾青素样品对比虾青素标准品进行液质联用分析得到其相对分子质量为596.3，与天然虾青素596.86的相对分子质量相符；经过薄层扫描仪的全波长扫描测得其紫外最大吸收波长为476 nm，与虾青素标准品的紫外最大吸收波长相符合，确证经常压硅胶柱色谱纯化后得到的目标分子为天然游离虾青素。结论与创新本论文通过一系列实验提取并纯化了南极磷虾中的虾青素，得到纯度为99.36%的游离虾青素。创新点是在分析过程中首次建立并确认了南极磷虾中虾青素的高效薄层色谱分析方法，并证明这一方法快捷、可靠且重现性好，同时采用常压硅胶柱色谱法对虾青素进行了初步纯化，通过液质联用及薄层扫描分析确证，方法特异性好且简便高效。