胡芦巴质量研究及对小鼠化学性肝损伤的作用

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目的:对不同产地胡芦巴及胡芦巴醇提取物(TFGe)中4-羟基异亮氨酸、胡芦巴碱进行薄层色谱法(TLC)鉴别及含量测定,建立高效液相色谱法(HPLC)测定胡芦巴及TFGe中4-羟基异亮氨酸含量、紫外法(UV)测定胡芦巴及TFGe中皂苷含量的方法;研究不同提取工艺对TFGe中功效成分的影响,优化提取工艺及制剂制备工艺;比较不同胡芦巴提取物的急性毒性,观察TFGe及制剂对刀豆蛋白A引起的小鼠化学性肝损伤的作用。方法:采用药典方法测定胡芦巴及TFGe中胡芦巴碱的含量;参考美国草药典测定胡芦巴及TFGe中4-羟基异亮氨酸的含量;建立UV法测定胡芦巴及TFGe中皂苷含量的方法;提取过程采取不同干燥工艺,通过检测4-羟基异亮氨酸、胡芦巴碱、皂苷的含量,优选提取工艺;采用刀豆蛋白A建立小鼠急性化学性肝损伤模型,用生理盐水做空白对照,水飞蓟宾胶囊为阳性对照,给予不同剂量的TFGe及TFGe片剂。试验结束观察肝脏病理组织变化并测定血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)水平。结果:4-羟基异亮氨酸在线性范围4.220.9μg·mL-1内线性关系良好(r=0.9993),平均回收率为96.8%,RSD为1.65%;甲基原薯蓣皂苷在0.050.25mg范围内与吸光度(A)呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为96.6%,RSD为1.16%;在减压真空干燥条件下,TFGe中各功效成成分含量稳定;TFGe最大耐受量大于40g·kg-1;TFGe能显著改善小鼠化学性肝损伤导致的肝细胞变性,显著降低化学性肝损伤小鼠的血清AST、ALT、LDH、ROS(P<0.01)水平。结论:采用RP-HPLC法测定胡芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量,该方法准确可靠、重现性好,可用于含量测定;TFGe提取工艺简单高效、稳定性好,经急性毒性试验TFGe安全性高,能明显改善小鼠化学性肝损伤状况,TFGe具有降低血脂,降酶保肝的作用。
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