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目的:本实验采用昆明小鼠作为实验材料，通过构建小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化、延迟着床及延迟着床激活和类固醇激素调节的动物模型，采用Real-time PCR、原位杂交和免疫组化的实验方法，研究了细胞朊蛋白(PrPc)在小鼠着床和蜕膜化子宫中及激素处理的表达情况，旨在探讨PrPc正常生理功能，并为解释胚胎着床的复杂分子机制奠定基础，为生殖医学等提供理论依据。
方法:(1)构建小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化、延迟着床及延迟着床激活和类固醇激素调节的的动物模型，体外分离培养小鼠子宫基质细胞;(2)采用Real-time PCR检测PrPc mRNA在小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化、类固醇激素调节动物模型中的表达水平;(3)采用原位杂交检测PrPc mRNA在早期妊娠、人工诱导蜕膜化、及类固醇激素处理的子宫中的表达;(4)采用免疫组化检测PrPc在小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化和延迟着床及延迟着床激活的表达。
结果:(1)小鼠早期妊娠的动物模型中，Real-time PCR结果表明PrPc mRNA在妊娠第8天时表达水平要显著高于第5天的表达;原位杂交表明，在妊娠第5天，PrPc mRNA在子宫的腔上皮和腺上皮以及围绕胚胎的腔上皮下基质中有表达，从妊娠第6天至第8天，PrPc mRNA在围绕胚胎的蜕膜区高度表达，并随着蜕膜化程度加强而加强;免疫组化结果表明，妊娠第5天时PrPc主要在胚胎着床位点处的腔上皮和腔上皮下基质中表达较强，在妊娠第6天时则主要定位在近腔侧蜕膜区，至妊娠第7、8天，蛋白在蜕膜区的免疫染色逐渐加深;在小鼠延迟着床激活的子宫中PrPc围绕胚胎着床位点处的腔上皮和腔上皮下基质中表达较强，同时腺上皮中也有所表达，而在延迟着床的子宫中腔上皮和腺上皮中的表达则相对较弱。(2)人工诱导蜕膜化的动物模型中，Real-time PCR、原位杂交和免疫组化结果相互印证，即PrPc mRNA与PrPc蛋白在蜕膜中的表达较强，而对照组子宫中PrPc mRNA表达与蛋白染色均较弱。(3)类固醇激素处理结果表明，孕酮处理后PrPc mRNA的表达有所下调，但差异不具统计学意义，说明PrPc可能不受孕酮的调节。
结论:(1) PrPc的mRNA和蛋白质表达水平随着蜕膜化程度的增加而增加，推测其参与小鼠的蜕膜化，参与妊娠的维持。(2) PrPc蛋白在着床位点出的特异性表达，推测其参与小鼠胚胎的着床。(3)孕酮处理后，PrPc的表达量并无显著差异，说明它在小鼠子宫基质细胞中可能并不受孕酮的调节。