杜香精油酶辅助-水蒸气蒸馏提取工艺及体外活性评价

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杜香是黑龙江省蓄积量丰富的野生植物资源,具有重要的香料价值和药用价值。本研究以生长于大兴安岭地区的杜香为研究对象,探索绿色、高效地提取杜香精油的方法。对提取得到的杜香精油进行分子蒸馏法分离,使用GC-MS联用法对各组分进行成分分析,探索杜香精油及其分馏所得6组分的抑菌活性、抗氧化性及对松材线虫的防治效果。主要研究结果如下:1、采用酶辅助-水蒸气蒸馏法高效地提取杜香精油,并经过单因素优化与响应面实验确定提取杜香精油的最佳条件。杜香精油的最佳条件为:酶的p H为5.5、料液比为1:20 g/m L、酶解时间为4 h、酶解温度为55℃、酶的浓度为1.5%、提取时间为1.5 h,在此优化条件下,杜香精油提取率为1.71%,较普通的水蒸气蒸馏法提高了67.65%。通过GC-MS解析鉴定出酶辅助-水蒸气蒸馏法提取得到杜香精油化学成分53种,水蒸气蒸馏法所得精油化学成分有44种,实验结果表明酶辅助方法使精油更好地释放出来,可以获取更多组分的杜香精油。2、酶辅助-水蒸气蒸馏法提取得到的杜香精油及其分馏所得6组分具有明显的抑菌活性、较强的抗氧化能力和杀松材线虫效果。(1)本研究选取了金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、痤疮丙酸杆菌和绿脓杆菌为供试菌种,分析杜香精油与分子蒸馏法得到的各组分的最低杀菌浓度MBC和生长曲线,结果表明精油各成分均高于对照组,均有显著的抑菌效果,其中轻油的抑菌能力强于重油,其中轻相3与轻相5的抑菌能力最强。(2)在体外抗氧化能力实验中,以抗坏血酸作为对照,分析杜香精油及其6个组分的DPPH自由基清除率、对ABTS自由基清除率、对羟基自由基的清除率,结果表明,杜香精油及其6个组分均具有抗氧化活性,其中轻油的抗氧化活性强于重油。
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