【摘 要】
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为了验证转录因子FOXD1(Forkhead D1)在人乳腺癌组织不同时期的表达差异,本实验采用实时荧光定量PCR和Western blotting对浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织中FOXD1的表达做了分
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为了验证转录因子FOXD1(Forkhead D1)在人乳腺癌组织不同时期的表达差异,本实验采用实时荧光定量PCR和Western blotting对浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织中FOXD1的表达做了分析。在此基础上,以浸润性乳腺癌为实验材料,应用ChIP技术初步富集了FOXD1作用的目的DNA。本实验首先对所收集的乳腺癌病例样本进行冰冻切片和HE染色分析,然后按照医学分类学方法对病例组织进行病理组织学分类和临床分期,将病例样本分为浸润性乳腺癌、乳腺原位癌、乳腺癌癌旁组织三类。在HE染色分析的基础上,我们选取了4例浸润性乳腺癌样本和4例乳腺癌癌旁样本作为实验材料,分别提取了这8例组织的总RNA和核蛋白进行了实时荧光定量PCR实验和Western blotting实验,实验结果利用生物统计学软件进行分析。在Western blotting实验分析的基础上,我们分别选取了两例FOXD1表达量相对较高的浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织作为实验材料,利用ChIP技术富集FOXD1作用的目的基因DNA片段,并通过核酸定量测定所得到的DNA片段的浓度。实验数据分析表明,无论是转录水平还是翻译水平,FOXD1在浸润性乳腺癌组织中的表达量均明显高于乳腺癌癌旁组织,且表达差异显著。核酸定量的结果表明,所富集的DNA能够进行下一步实验。
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