苹果组培苗多代保存过程中生长特性及生长节奏调控技术研究

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本研究以苹果(Malus domestica Borkh.)品种金矮生、乔纳金、富士和嘎拉试管苗为试材,对不同继代次数苹果组培苗的芽增殖能力、生根能力和叶片再生能力进行研究,以确定长期继代保存的苹果组培苗的生长繁殖能力是否发生变化;通过改变培养温度、增加培养基的渗透压或在培养基中加入生长抑制剂等处理,延缓苹果组培苗生长,以延长继代间隔时间、减少继代次数;同时对延缓生长和恢复生长后的苹果组培苗SOD、POD酶活性及MDA含量进行了测定,以检测苹果组培苗逆境下延缓生长的生理代谢变化,为确定苹果组培苗适宜的种质保存时间,筛选适合的延缓生长方法提供依据。试验结果表明:1.苹果组培苗在继代5代以内时,继代增殖倍数、生根和叶片不定芽再生能力均较低,不适合进行快速繁殖和离体再生。2.苹果种质保存组培苗继代13次以后,其芽增殖能力,生根能力和叶片再生能力均稳定在较高水平,经20年左右100多次(富士200多次)继代培养保存后,4个品种器官生长、繁殖能力无明显变化。3.低温条件抑制试管苗生长效果明显,苹果试管苗适宜的低温处理为接种后在25℃条件下缓苗5~10d再移至3~8℃培养,这样可保存试管苗1~1.5年继代一次,茎尖成活率达100%。4.提高培养基琼脂、蔗糖浓度或添加甘露醇都能提高培养基渗透压,抑制试管苗生长,且随着浓度增加,抑制作用愈发明显,但琼脂、甘露醇处理中有部分茎尖死亡;综合比较,60/L蔗糖处理延缓试管苗生长效果较好。同一处理下品种间有差异,富士延缓生长的效果好于乔纳金。5.在室温下添加B9、CCC、PP333、ABA等生长抑制剂的处理中,以80m/LB9效果较好,不但存活率高,而且试管苗的生长状况较好。6.在培养基中提高蔗糖、琼脂浓度,添加甘露醇增加渗透压,或者在培养基中添加B9、CCC、PP333、ABA等生长抑制剂,均能使乔纳金和富士的试管苗SOD、POD活性提高,MDA含量降低。不同处理的不同浓度对保护酶活性和MDA含量影响不同。对恢复生长后的试管苗生理活性测定表明,当代SOD、POD活性和MDA含量就恢复到处理前水平。
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