粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)Ha1菌株除草活性成分及复合菌剂研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shao402248950
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Ha1菌株是实验室前期从海洋微生物中分离得到的具有高除草活性的细菌,经16S rDNA鉴定为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)。为了明确其产生的除草活性物质和田间应用前景,本研究采用活性追踪分离法对Ha1菌株进行除草活性成分的分离,对Ha1菌株与死谷芽孢杆菌复配颗粒剂进行研制,进一步探究颗粒剂与化学除草剂减量复配对玉米田杂草的田间防效。取得的主要结果如下:(1)采用平皿法和茎叶喷雾法测定了 Ha1菌株菌悬液不同溶剂萃取物的除草活性。结果显示,在1 mg/mL浓度下,Ha1菌株菌悬液石油醚萃取物对稗草和马唐根抑制率分别为55.01%和71.14%;乙酸乙酯萃取物对反枝苋的幼根和幼茎抑制率分别为58.61%和53.20%;将石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物合并稀释至0.65 mg/mL后,发现萃取物对反枝苋幼根和幼茎抑制率分别为48.17%和41.47%。可见,Ha1菌株的除草活性成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取物。(2)活性成分分析显示,石油醚萃取物主要成分为2,4-二叔丁基苯酚(2,4-Di-tert-butylphenol)和 14-甲基十六烷酸甲酯(Ethyl 14-methyl-hexadecanoate),含量分别为38.82%和8.37%。(3)乙酸乙酯相萃取物初步分离为7个极性段,其中F3极性段对杂草的除草活性最好,对稗草根和茎抑制率分别为65.49%和35.24%,对反枝苋根和茎抑制率分别为74.42%和55.66%;其次为F5极性段,对反枝苋根和茎抑制率分别达到了 73.41%和55.21%;F6极性段对反枝苋也有一定的抑制作用,抑制率均达到了 50%以上。利用硅胶柱层析共分离出8个单体化合物,其中化合物F3-1对反枝苋和稗草根抑制率为54.78%和39.68%;化合物F5-3对反枝苋的根抑制率为54.51%;化合物F6-4对反枝苋和稗草的根抑制率分别为53.99%和55.58%,并且只有化合物F6-4对反枝苋茎表现出了抑制作用,抑制率为38.38%,经过鉴定,确定化合物F6-4为3-异丁基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮。(4)采用茎叶喷雾法测定了 Ha1菌株与死谷、枯草、贝莱斯和解淀粉芽孢杆菌4个菌株菌悬液分别复配后的除草活性,综合对杂草不同部位的抑制效果,得出Ha1菌株与死谷芽孢杆菌两种菌悬液复配后对杂草的抑制效果较好,其对稗草和反枝苋的地上部鲜重抑制率超出Ha1菌株单一菌悬液,对稗草和反枝苋的鲜重抑制率分别达到67.92%和73.24%;将此复合菌悬液加工成颗粒剂,生物特性检测结果表明其符合国家标准。(5)Ha1菌株复合菌剂与常用化学除草剂复配田间试验表明,苗前处理化学除草剂40%乙·莠悬乳剂与Ha1菌株复合菌剂复配对杂草28 d的株数防效和鲜重防效分别为80.65%和98.02%,处理区玉米产量与对照区玉米产量相比提高6.7%。苗后处理中26%烟·莠可分散油悬浮剂与Ha1复合颗粒剂复配对杂草14 d鲜重防效为98.62%,28 d株数防效与鲜重分别是85.16%和99.59%,产量较对照区提高了 17.93%。室内及田间试验表明Ha1菌株对杂草具有很好的抑制作用,并且对作物具有很高的安全性,有效减少了化学除草剂的使用,本研究为新型微生物除草剂的创制和农药的减量增效奠定了基础。
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