血栓是一种常见的慢性疾病,它与多种心血管疾病相关,已经成为全球致死致残的首因。当前血管造影剂常采用碘造影剂、钆类造影剂等,但这类造影剂用量大,易出现过敏反应和肾毒性损伤,从而限制了造影剂的使用,也限制了血栓的诊断。若增强血管造影剂的靶向性,则可减少造影剂的使用量并增加血栓诊断效果。脂质体是由磷脂等双亲性脂质材料在水中有序排列形成的双层膜囊泡,常用作药物载体系统。通过一些化学修饰,不同的结构的磷脂可以形成一些特殊性质的脂质体,如pH敏感型脂质体、温度敏感型脂质体、酶敏感型脂质体、超声敏感型脂质体、光化学敏感型脂质体和氧化应激敏感型脂质体等。随着医学、分子生物学和材料学的发展,人们发现血小板为椭球形细胞结构,具备一定的剪切力敏感性,在高剪切力下发生形变被激活。人们发现采用合适的材料可制备出仿生型的剪切力敏感型药物载体系统,因其可有效提高药物特异性释放而备受关注。本课题全合成了一种功能性磷脂1,3-二棕榈酰胺磷脂酰胆碱(Pad-PCPad),以该功能性磷脂为膜材,设计构建了一种具备剪切力敏感性质的药物载体系统,其内包载具有钙黄绿素或Di I。该合成磷脂构建的载体系统利用其特殊的剪切力敏感性,在高剪切力部位特异性地释放其内含物从而发出荧光,为血栓诊断功能性载体系统的设计提供一定的参考。本研究第一章全合成了功能性磷脂Pad-PC-Pad,并对中间产物和目标产物进行薄层色谱、核磁和质谱的表征。首先,将Boc基团与乙醇胺共价连接,薄层色谱结果表明已经成功合成了Boc保护的乙醇胺。再将Boc保护的乙醇胺、1,3-丙二醇和三氯氧磷共价连接形成化合物3,TLC和1H核磁图表明成功合成化合物3。化合物3中氯原子用叠氮基团取代,氢化后产物与棕榈酰氯共价连接形成化合物6,经TLC、1H核磁图和MS图表征,化合物6已经成功合成了。化合物6脱去Boc基团保护,氨基结构被甲基化后形成目标产物Pad-PC-Pad,1H核磁图和MS图表明成功合成Pad-PC-Pad。本研究第二章以Pad-PC-Pad和天然磷脂PC-98T为膜材,薄膜水化法制备剪切力敏感型脂质体(SSSL)和传统脂质体(TL),对SSSL制备过程中薄膜水化温度和探头超声的时间和功率进行筛选,并对SSSL和TL进行理化性质的表征和稳定性的考察。SSSL制备条件筛选结果显示,水化温度60℃,探头超声(功率50W,工作2s,暂停2s)5次为最佳制备条件,制备的SSSL粒径分布均一且平均粒径较为稳定。TL和SSSL的粒径分别为(105.5±3.8)nm,(106.9±1.2)nm,粒径较为均一且呈单峰分布。Zeta电位分别为(-12.5±1.5)mV,(+14.6±2.1)mV。透射电镜下SSSL呈现椭球形,TL呈现球形结构,分布均较为均一。TL和SSSL常温下放置一周,两组制剂平均粒径无明显变化,未发生明显聚集,两组无显著性差异。TL和SSSL释放度随着放置时间延长,稍有增加,但均不超过5%,表明两组制剂均较为稳定。本研究第三章对各脂质体进行了剪切力敏感性的评价。首先以具有聚集淬灭特性的荧光染料-钙黄绿素为包载物,薄膜水化法制备TL和SSSL,以探头超声模拟剪切力作用,考察不同温度不同探头超声功率下两组脂质体的钙黄绿素的释放情况。实验结果表明,TL和SSSL不同功率下的释放度均与温度有关,随着温度升高,释放度显著增加。但两组制剂在相同条件下,SSSL的释放度远强于TL组。37℃时,TL组释放度约为20%,而SSSL组释放度达65%。脂质体剪切力敏感性还和Pad-PC-Pad的含量有关,Pad-PC-Pad含量越高,剪切力敏感性越强。利用局部狭窄的模拟装置,考察不同剪切力下的TL和SSSL在狭窄部位的释放情况。结果显示,随着剪切力增加,TL在狭窄部位的释放稍有增加,而SSSL在高剪切力下狭窄部位的释放显著增加,进一步证实SSSL具备剪切力敏感性。本研究第四章以HUVEC细胞为细胞模型,通过MTT实验考察制剂的细胞毒性,通过DiI荧光探针对脂质体的细胞摄取情况进行了研究。细胞毒性实验表明TL和SSSL对HUVEC细胞均无明显影响,表明TL和SSSL具备生物安全性。细胞摄取结果显示,剪切后SSSL组胞内的荧光强度明显高于其他组,表明HUVEC细胞对剪切后的SSSL的摄取能力明显强于其他三组制剂。本研究第五章以KM小鼠为动物模型,以氯化铁法对肠系膜动脉进行局部阻塞的造模,对TL和SSSL进行血栓诊断能力的评价。血栓模型造模成功后,在显微镜下观察TL和SSSL组血管狭窄部位的荧光强度。结果显示SSSL组在血栓部位的荧光显著强于TL组。表明构建的SSSL可以对血栓部位进行有效地诊断。综上所述,本研究成功合成了功能性磷脂Pad-PC-Pad,该磷脂制备的椭球形脂质体具备一定的剪切力敏感性,可以有效地用于血栓诊断。