Ras association domain family 6 (RASSF6)是一种C-末端RAS相关结构域第六号家族蛋白基因,其位于4号染色体长臂1区3号带,包含了13个外显子以及3个不同的转录本。RASSF家族蛋白参与细胞凋亡,调控细胞周期,维持微管稳定等生理过程,在hippo-way信号通路中起重要作用,在肿瘤发生、发展、转移的过程中扮演着肿瘤抑制因子的角色。目前已经报道了RASSF6的表达缺失可以抑制包括甲状腺癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肾癌细胞生长,细胞活性显著降低,侵袭性下降,表现出明显的肿瘤抑制功能。另一方面,RASSF6的表达缺失与P53基因有紧密联系,可能在肿瘤的早期预防、干预治疗、术后监测起到重要作用。目前关于RASSF6基因与结直肠癌的关系尚不十分清楚,研究成果大多只是运用全基因组关联的方法来研究分析单核苷酸多态性和拷贝数变异与多种肿瘤发病风险的关联性。而从细胞功能实验角度验证RASSF6基因的表达情况在结直肠癌等恶性肿瘤中的作用未被报道。因此尚不能确定RASSF6与结直肠癌病发的潜在关系。揭示RASSF6在结直肠癌细胞系中的表达则成为探究结直肠癌发病机制、确定新的分子标识物的关键。本课题旨在通过分析RASSF6基因在人体结直肠癌细胞系以及正常人结直肠细胞系中表达的结果,明确其在结直肠癌细胞与正常肠粘膜上皮细胞间是否存在表达差异；检测RASSF6蛋白在结直肠癌患者癌组织与癌旁正常组织间是否存在表达差异,为进一步深入研究RASSF6蛋白参与结直肠癌发生发展的作用机制奠定实验基础。本课题运用实时荧光定量RT-PCR(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)技术对人体结直肠癌细胞系及正常人结直肠细胞系中RASSF6进行mRNA表达水平分析；运用蛋白免疫印迹法(western-blot)分析这两种细胞系的RASSF6蛋白表达水平；通过免疫组化分析RASSF6蛋白在结直肠癌肿瘤组织与癌旁正常组织中的表达差异。本研究结果显示RASSF6基因在结直肠癌细胞系与正常细胞的系的mRNA表达量有显著差异。蛋白免疫印迹结果表明,RASSF6蛋白表达量与结直肠癌显著相关。运用组织芯片技术进行免疫组织化学染色法显示结直肠癌细胞中的RASSF6蛋白的免疫组化阳性表达呈棕黄色颗粒状,同时结直肠癌组织中的RASSF6蛋白的免疫组化阳性表达率为63%(31/49)要明显低于人正常组织91%(45/49)(p<0.05),并显示其与性别、年龄、脏器内转移等临床信息无显著相关性。结论：RASSF6的mRNA和蛋白表达趋势一致,其在癌细胞中的表达下调可能暗示其与结直肠癌的发生发展相关,在肿瘤组织类型与病理分期上可能存在一定关联性并为后续实验提供理论依据与线索。