【摘 要】
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目的：研究细胞外尼克酰胺磷酸核糖转移酶(eNAMPT)对脑缺血损伤的影响,并探寻其作用机制。方法：大鼠侧脑室注射野生型NAMPT蛋白和丧失酶活性的突变NAMPT蛋白H247A,通过大脑中动
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目的：研究细胞外尼克酰胺磷酸核糖转移酶(eNAMPT)对脑缺血损伤的影响,并探寻其作用机制。方法：大鼠侧脑室注射野生型NAMPT蛋白和丧失酶活性的突变NAMPT蛋白H247A,通过大脑中动脉栓塞(MCAO)复灌诱导大鼠局灶性脑缺血,以缺糖缺氧(OGD)诱导原代混合神经细胞和原代神经元损伤,Western检测NAMPT表达,免疫组化观察NAMPT分布变化,TTC染色计算梗死损伤体积,MTT与LDH释放检测细胞活性,PI、DAPI染色检测细胞坏死,ELISA检测TNF-α释放。结果：MCAO再灌注后24小时,缺血中心区eNAMPT水平上升,mRNA水平下降,缺血中心区、周边区和假手术组脑内,NAMPT均主要分布在神经元。重组NAMPT蛋白脑室内注射能够加重MCAO引起的脑缺血性损伤。在原代培养神经元,重组NAMPT蛋白对正常和OGD诱导的神经元损伤均无明显影响。但在原代培养神经细胞,重组NAMPT蛋白能浓度依赖的加重OGD诱导的神经元,同时可以浓度和时间依赖的引起TNF-a释放,TNF-a中和抗体能够减去OGD诱导、NAMPT蛋白加重的神经元损伤。NAMPT突变蛋白H247A的作用野生型NAMPT相似。结论：脑缺血后,血NAMPT进入脑内,使eNAMPT水平增加,eNAMPT能够加重大鼠脑缺血性损伤,这种损伤是通过作用于胶质细胞而释放TNF-a发生,并且与其催化作用无关。
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