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目的对蜘蛛香有效成分调控脂质代谢作用进行研究,并探讨其作用机制。方法1.采用MTT法检测不同浓度药液对HepG2细胞存活的影响,确定以2mmol/L的油酸诱导建立人肝癌HepG2细胞脂肪变性模型,160μg/mL非诺贝特为阳性对照,油红O染色法及酶法分别检测6、12.5、25μg/mL的蜘蛛香素E对HepG2细胞内脂滴沉积及甘油三酯含量的变化。Western Blot法检测HepG2细胞载脂蛋白A5(ApoA5)的蛋白表达。2.采用高脂饲料建立大鼠高脂血症动物模型,以2mg/kg/d的辛伐他汀作为阳性对照,灌胃7.5mg/kg/d、15mg/kg/d、30mg/kg/d的蜘蛛香总环烯醚萜。双试剂直接法测定大鼠血清及肝组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)的含量,微板法测定血清中总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量,苏木精-伊红(HE)染色法对肝组织进行病理切片观察。比色法检测大鼠肝组织中脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)的活性,ELISA法检测肝组织中载脂蛋白A5(ApoA5)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、肝X受体α(LXR-α)的蛋白表达。结果1HepG2细胞脂肪变性模型成功建立,油红O染色光学显微镜下观察,模型对照组细胞内出现了大量的脂滴沉积。与模型对照组相比,随着蜘蛛香素E浓度的增加,细胞内红色脂滴的数量明显减少；6、12.5、25μg/mL蜘蛛香素E组细胞内TG含量均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),且细胞内TG含量随蜘蛛香素E浓度的升高而减少,呈剂量依赖性。Western Blot法检测ApoA5的蛋白表达与TG的减少呈正相关。2.大鼠高脂血症动物模型成功建立,与模型对照组比较,4mg/kg/d辛伐他汀组、7.5mg/kg/d、15mg/kg/d、30mg/kg/d蜘蛛香总环烯醚萜组可不同程度的减缓大鼠体重的增加；降低大鼠血清及肝组织中TC、TG、LDL-C的含量,升高HDL-C的含量,其中对血清TG含量的降低最为明显,均具有显著性差异(P<0.01)；蜘蛛香总环烯醚萜低剂量组可显著性降低大鼠的肝脏指数(P<0.05),高剂量组可极显著性降低大鼠血清TBA、ALT、AST的含量(P<0.01)；肝组织病理观察结果显示,低剂量组与模型对照组相比胞质内未见明显空泡且无病变,具有保肝作用。进一步的作用机制研究结果显示,蜘蛛香总环烯醚萜低、高剂量组分别能极显著性增强LPL(P<0.01)、显著性增强HL(P<0.05)的活性,高剂量组能极显著性上调ApoA5、PPAR-α的蛋白表达(P<0.01),低、高剂量组能极显著性下调SREBP-1c、LXR-α的蛋白表达(P<0.01)。结论1.蜘蛛香素E可有效抑制油酸诱导后HepG2细胞内脂质堆积,其机制可能与其提高ApoA5的蛋白表达有关。2.蜘蛛香总环烯醚萜可明显促进高脂血症大鼠血脂、肝脂代谢,并具有保肝作用,其机制可能与其激活PPAR-α的蛋白表达,抑制SREBP-1c、 LXR-α的蛋白表达,从而上调ApoA5的表达以及提高脂代谢相关酶LPL、HL的活性有关。以上说明,蜘蛛香有效成分具有良好的调控脂质代谢作用。