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目的 动脉粥样硬化是威胁人们健康的重要疾病，常见的器官病变为冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病，CHD)，在欧美发达国家，1／3～1／2人口死于CHD，在我国近年来发病率呈增长趋势。糖尿病是当今社会的常见病和多发病，由于患病率逐年增高，越来越受到社会各界的重视。糖尿病患者的动脉粥样硬化的患病率高，发病年龄轻，病情进展也较快。流行病学研究发现70％2型糖尿病患者死于心血管疾病，1型糖尿病患者心血管疾病发病率虽显著低于2型糖尿病，但也比相同年龄的元糖尿病者高10％。脂肪肝是常见的肝脏疾病，单纯的脂肪肝可转化为肝纤维化、肝硬化，甚至肝功能衰竭。2型糖尿病及代谢综合征患者通常伴有脂肪肝，因此有学者建议将脂肪肝列为代谢综合征的一个成分。动脉粥样硬化及脂肪肝的形成和进展均源于脂代谢异常，因此当前对糖尿病脂代谢方面的研究倍受重视。目前，对致动脉粥样硬化因子的研究较多，对抗动脉粥样硬化因子的研究却很少，而抗动脉粥样硬化因子与致动脉粥样硬化因子对于动脉粥样硬化的形成和进展同等重要，如何能对抗动脉粥样硬化的进展是人们新的期望。 高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)是已知的抗动脉粥样硬化因子，主要是通过抗氧化及参与胆固醇的逆向转运起到抗动脉粥样硬化作用，流行病学研究也提示HDL-C水平升高的作用可能在降低血脂异常者CHD事件上相当重要。HDL颗粒的组成不同抗动脉粥样硬化的作用亦不同，组成的差异又受其代谢的影响。在HDL-C的代谢过程中清道夫受体B1(SR-B1)起重要作用。SR-B1是近年发现的HDL受体，广泛表达于肝脏、产类固醇组织、小肠刷状缘、动脉粥样硬化病变部位，参与胆固醇的逆向转运——将血管壁及外周的胆固醇运至肝脏，并通过胆汁排出体外，认为是一种抗动脉粥样硬化因子。肝脏是脂代谢的中心，合成并代谢多种参与脂代谢的酶及脂蛋白受体，也因此有学者称动脉粥样硬化是一种肝脏疾病。目前关于长期糖尿病肝脏SR-B1的表达还未见报道。本实验通过观察致动脉粥样硬化食诱导的动脉粥样硬化小鼠、STZ诱导的1型糖尿病小鼠及高脂高糖食诱导的2型糖尿病小鼠血脂、肝脏病理、脂质含量及SR一Bl表达，探讨动脉粥样硬化、1型糖尿病及2型糖尿病的脂代谢与HDL受体—SR一Bl的关系。材料与方法 1.动物模型的制备 未经处理的6一8周龄(STz诱导的1型糖尿病小鼠除外)的雌性c57Bu6)小鼠，购于中国医科大学动物实验中心。 ①对照组:喂以正常鼠食含4%的脂肪、24%蛋白、4.5%粗纤维)，喂养16周，共10只。 ②致动脉粥样硬化食(ATH食)组:ATH食含巧%脂肪(主要是猪油)、1.25%胆固醇和0.5%胆酸钠。组A，未经处理的C57BI了6J小鼠，喂以正常鼠食8周，之后喂以ATH食8周，共5只;组B，未经处理的C57B口6J小鼠，喂以ATH食16周，制成动脉粥样硬化模型，共10只。 ③1型糖尿病组:4周龄的C57B口6J小鼠腹腔注射STZ(购自美国519-ma公司，4om岁kg，PH4 .4，无菌柠檬酸缓冲液稀释，每天腹腔注射一次，连续5天)，开始注射4周后非空腹血糖高于15~OFL认为糖尿病模型制备成功，喂以正常鼠食，自由饮水，自由摄食，喂养16周，共ro只。 ④高糖高脂食组:高糖高脂食含355『 kg脂肪(占总热量的58%，主要是猪油)，366岁kg碳水化合物(主要是蔗糖)。组A，喂以正常食8周，之后喂以高糖高脂食8周，共5只;组B，喂以高脂高糖食16周，共10只。 2.测定如下指标: ①血脂、血清胰岛素(INS)及空腹血糖(FBG):选择性遮蔽法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白一胆固醇(HDL一c);法测定FBG;放免法测定INS。 ②肝脏脂质含量测定:将动物肝脏洗尽血迹，测定肝质量。取少量剪成小块，置110℃烘至恒质量，精确称取干燥后的肝脏。磨成细粉，加抓仿:甲醇(2:1，V/v)，抽提定容，再按上述测定血清脂质的方法测脂质含量。 ③肝脏病理:取肝脏一部分40岁L甲醛固定后，做石蜡切片，HE染色。另一部分做油红“O”染色。 ④westem blot方法测定肝脏SR一Bl的表达:取方0℃保存的各组动物肝组织loomg，提取细胞膜蛋白，助wry法蛋白定量，经sDS一聚丙酞胺凝胶电泳，转印于NC膜，先后加人一抗及二抗，一抗采用兔抗小鼠的SR一B1多克隆抗体(购自美国Novu。生物工程公司)，二抗采用小鼠抗兔抗体(购自北京中山生物工程公司)，显色至条带呈现，采用GIS一ooD数码凝胶图像处理系统扫描测定肝脏SR一Bl的表达。 ⑤腹部瘦肉及脂肪测定:应用美国NORLAND XR一6双能X线骨密度仪测定对照组及高脂高糖食组小鼠腹部瘦肉量及脂肪量。 ⑥主动脉根部油红“O”染色:ATH食组动物处死后，全心脏和主动脉根部标本福尔马林固定，连续冰冻切片，油红“O”染色。 3.统计学处理:所有数据以又土。表示，采用t检验。结果 1 .ATH食组动物 ①ATH食组B动物主动脉根部有动脉粥样硬化斑块形成，油红“O”染色示呈橘红色。ATH食组A动物主动脉未见明显变化。 ②进ATH食小鼠血清TC显著高于对照组小鼠(P<0 .01)，组A及组B分别为对照组小鼠的2.0和2.4倍，组B?