滋肾宁心方对去势雌兔合并动脉粥样硬化模型的实验研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:erpangpang
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目的:(1)通过文献综述,阐述绝经后冠心病的发病机理,及其与内科冠心病的异同,探讨中西医对本病的认识和治疗方法;(2)观察去势后普通饲料喂养和去势高脂饲料喂养雌兔血清性激素、血脂等的影响,研究单纯去势对兔主动脉粥样硬化模型的形成的影响,以及去势后高脂饲料喂养对模型形成的影响;(3)通过观察滋肾宁心方与雌激素替代疗法对去势高脂喂养雌兔血清性激素、血脂、内皮细胞凋亡、平滑肌增殖等的影响,探讨滋肾宁心方防治绝经后冠心病的作用机制。方法:(1)收集文献,从中医和西医两方面进行绝经后冠心病病因病机和治疗方法的探讨;(2)将27只雌兔,随机分为假手术组、去势组,去势高脂组共3组,每组9只。分别行假手术和双侧卵巢切除术,术后均喂饲相应饲料,连续12周。实验结束后,禁食12小时,心脏采血收集血清标本,TG、TC、HDL-C用酶法测定;E2、FSH、LH采用放免法测定。空气栓塞法处死动物,取主动脉,用HE染色观察形态学变化;(3)将36只雌兔随机分为假手术组、模型组,中药组和西药组共4组,每组9只。分别行假手术和双侧卵巢切除术,术后喂饲高脂饲料,滋肾宁心方组和倍美力组每日灌胃1次,连续给药12周。实验结束后,禁食12小时,心脏采血收集血清标本,TG、TC、HDL-C用酶法测定;E2、FSH、LH采用放免法测定。空气栓塞法处死动物,主动脉取材,用HE染色观察形态学变化,免疫组化法检测ER、Bcl-2、Bax、PCNA的表达,RT-PCR法检测PDGF-BmRNA、VCAM-1mRNA的表达。流式细胞仪法检测内皮细胞凋亡率。结果:(1)绝经后冠心病中医认为肾虚是根本原因,以肾为本论治绝经后冠心病是中医的主要治法,西医认为主要是雌激素减少对心血管保护作用减弱所致,采用性激素替代疗法,但其作用还存在争议。(2)三组间E2水平差异无统计学意义。三组间FSH、LH水平差异有统计学意义(P<0.05),去势组、去势高脂组与假手术组比较均明显增高,结果有统计意义(P<0.05)。去势高脂组TC、LDL、HDL水平与假手术组、去势组比较差异有统计学意义(P<0.05),TG水平三组间比较差异无统计学意义。假手术组和去势组内膜光滑,无斑块形成;去势高脂组内膜有白色脂样物向管腔凸出;HE染色可见,去势组内膜有轻微增厚,去势高脂组内膜显著增厚,斑块隆起明显,内含大量泡沫细胞。(3)①E2水平各组间差异无统计学意义;FSH、LH水平比较,模型组、西药组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),中药组与假手术组差异无统计学意义,LH水平假手术组与模型组之间差异有统计学意义(P<0.05)。②TC、LDL-C水平比较,模型组、中药组、西药组与假手术组之间差异有统计学意义(P<0.05),中药组、西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),说明中药和西药都有降低血清TC和LDL-C水平,但两药之间差异无统计学意义;TG水平比较,各组比较差异无统计学意义;HDL-C水平比较,模型组、中药组、西药组与假手术组之间差异有统计学意义(P<0.05),中药组、西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两药HDL-C水平均出现降低,APOA1水平比较,中药组、西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③雌激素受体的表达各组间比较,假手术组明显高于其他组,模型组、西药组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),中药组与假手术组比较差异无统计学意义。中药组、西药组与模型组比较,表达均有所增加,但以中药组增加较为显著。④模型组内膜显著增厚,斑块隆起明显,内含大量泡沫细胞。中药组、西药组的病变较模型组有不同程度的减轻。⑤对内皮细胞凋亡的影响:各组间比较差异无统计学意义,模型组、中药组、西药组与假手术组比较凋亡率均有升高,中药组、西药组与模型组比较均有下降,但各组间差异无统计学意义。Bcl-2的表达,模型组、中药组、西药组与假手术组比较有所下降,中药组、西药组与模型组比较均有所升高;Bax的表达,模型组、西药组与假手术组比较有所升高,中药组、西药组与模型组比较表达降低,但各组间差异无统计学意义。⑥对平滑肌增殖的影响:模型组与假手术组比较(P<0.05),PcNA表达增加,说明去势后高脂喂养对平滑肌增殖有促进作用,中药组、西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两药之间差异无统计学意义。PDGF-BmRNA的表达各组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),中药组、西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两药间差异无统计学意义。⑦对粘附分子-1(VCAM-1)的影响:VCAM-1mRNA的表达各组与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05),中药组和西药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两药间差异无统计学意义。结论:①滋补肾阴是治疗绝经后冠心病的主要治法,现代医学激素补充疗法是绝经后冠心病一级预防的主要方法。②去势对雌兔主动脉有影响,但不能形成典型动脉粥样硬化模型,而高脂饲料喂养可以形成去势雌兔合并动脉粥样硬化模型;③滋肾宁心方能调节性激素水平,升高E2水平,降低FSH、LH水平,纠正内分泌紊乱;降低LDL-C、TC,改善血脂代谢,对抗动脉粥样硬化;增加主动脉雌激素受体的活力,保护血管内皮,抑制平滑肌增生等几个方面来影响绝经后冠心病的发生发展。
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