【摘 要】
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该论文的目的是:(1)建立在植物油体中表达外源蛋白的表达体系,以简化目的蛋白的分离纯化过程;(2)对维管束特异表达的Profilin2启动子进行区段分析,寻找控制维管束特异表达的
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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该论文的目的是:(1)建立在植物油体中表达外源蛋白的表达体系,以简化目的蛋白的分离纯化过程;(2)对维管束特异表达的Profilin2启动子进行区段分析,寻找控制维管束特异表达的区段和元件,为在抗维管束病害的基因工程中使抗病基因产物直接在维管束中特异表达并对病原体建立防御体系,以节省能量,同时增加转基因作物的安全性.为建立油体表达体系,该论文进行了以下研究:(1)分离和克隆了油菜Oleosin基因的启动子及编码芝麻Oleosin蛋白的结构基因.(2)克隆了鲑鱼降钙素的突变基因msCT[Ser<6>,des-Leu<19>],将其插在芝麻油体蛋白Oleosin基因的C端.据文献报道,鲑鱼降钙素(sCT)在治疗缺钙症等中有明显的疗效.(3)构建了由油菜Oleosin基因启动子驱动的Oleosin-Calcitonin融合蛋白植物表达载体,转化油菜和棉花,获得了转基因植株.转基因油菜经PCR检测,证明降钙素基因已整合到油菜基因组中.转基因棉花经PCR-Southern和Western检测,证明msCT基因在棉花中整合并在油体中表达.目前已得到T<,2>代转基因棉花株系44个,由于在田间对T<,1>、T<,2>代植株的叶片用高浓度(5000ppm)的卡那霉素溶液涂抹,故筛选出的Kan株理论上应为高表达的个体.
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