目的:探究应激状态下大鼠肠粘膜屏障功能的改变,以及在此过程中某些细胞因子的作用和它们之间的相关性,以期初步了解肠屏障损伤的细胞生物学机制,寻找能够阻断肠屏障功能损伤过程的保护因素,为临床严重应激和危重病患者的治疗和预后探索新的途径。 方法:健康Wistar大白鼠60只,雌雄不限,随机分为实验组、对照组和正常组,每组20只。实验组通过以显微手术用无损伤动脉夹夹闭肠系膜上动脉起始部,1小时后松夹恢复肠系膜上动脉血流制成肠缺血后再灌流模型,对照组只进行同样腹部手术操作但不夹闭肠系膜上动脉。正常组不手术。6小时后处死动物,3组同样进行肠系膜上动脉多聚甲醛灌注,取距回盲部15厘米处肠管1厘米,常规固定、石蜡包埋,组织切片,通过普通HE染色观察肠粘膜组织细胞学形态;用免疫组织化学方法染色显示肠粘膜组织或细胞中肿瘤坏死因子、血管活性肠肽、基质金属蛋白酶-13及层粘连蛋白的表达情况;并用VIDAS图象分析系统进行半定量分析。 结果:普通HE染色结果显示:光镜下,实验组与对照组相比,可见肠壁变薄,上皮细胞水肿明显,部分坏死脱落,小肠绒毛短细,绒毛间距变宽。中性粒细胞及淋巴细胞浸润,个别肠粘膜固有层内腺体出现灶性区域坏死。免疫组织化学染色显示:实验组肠粘膜上皮细胞胞浆及基质肿瘤坏死因子表达较对照组增高,VIDAS图象分析测得光密度值分别为:实验组0.45±0.0183,对照组0.27±0.0196,正常组0.26±0.0187;粘膜组织中基质金属蛋白酶-13表达较对照组增高,VIDAS图象分析测得光密度值分别为:实验组0.29±0.0253,对照组0.16±0.0249,正常组0.15±0.0251;基底膜层粘连蛋白表达较对照组降低,VIDAS图象分析测得光密度值分别为:实验组0.29±0.0672,对照组0.47±0.0685,正常组0.50±0.0679,实验组和对照组之间统计学比较差异有显著性(P<0.01),对照组与正常组相比无明显差异