【摘 要】
：
干扰素诱导跨膜蛋白（IFITMs）在病毒感染引起的天然免疫反应中发挥重要作用。研究表明IFITM1、2、3参与机体的先天性免疫反应,可以抑制多种囊膜RNA病毒感染。猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种引起猪肠道传染病的病原,感染仔猪病死率高,严重危害我国养猪业。PEDV是单股正链RNA病毒,有囊膜结构。本研究发现PEDV感染IPEC-J2细胞后诱导了内源IFITM1的表达,过表达IFITM1能够抑制
论文部分内容阅读
干扰素诱导跨膜蛋白（IFITMs）在病毒感染引起的天然免疫反应中发挥重要作用。研究表明IFITM1、2、3参与机体的先天性免疫反应,可以抑制多种囊膜RNA病毒感染。猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种引起猪肠道传染病的病原,感染仔猪病死率高,严重危害我国养猪业。PEDV是单股正链RNA病毒,有囊膜结构。本研究发现PEDV感染IPEC-J2细胞后诱导了内源IFITM1的表达,过表达IFITM1能够抑制PEDV对宿主细胞的感染,并在病毒感染的入侵阶段发挥作用。本研究旨在探索猪源IFITMs对PEDV感染宿主细胞的影响。主要研究内容如下:1.PEDV感染引起IPEC-J2细胞中免疫相关的细胞因子表达变化。通过Real-Time PCR检测PEDV（MOI=0.1）感染IPEC-J2细胞后不同时间点的增殖情况,以及细胞干扰素、白细胞介素和IFITMs的m RNA水平。2.研究IFITM1对PEDV感染的影响。通过慢病毒转导系统及RNAi干扰技术构建稳定过表达和敲降IFITM1表达的猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）系,Real-Time PCR试验结果显示过表达IFITM1可抑制PEDV在IPEC-J2中增殖,而干扰IFITM1表达则促进该病毒的增殖,表明IFITM1参与抑制PEDV在宿主细胞的增殖。3.揭示IFITM1抑制PEDV感染的具体阶段和影响该功能的重要氨基酸。构建基于真核表达载体p CINEO的野生型及突变体IFITM1,并在IPEC-J2细胞中瞬时表达,再以MOI=0.1 PEDV感染细胞。通过间接免疫荧光试验（Immunofluorescence assay IFA）观察PEDV感染后细胞内IFITM1及PEDV的定位变化,结果显示瞬时表达IFITM1的细胞中可观察到IFITM1位于细胞质中,围绕细胞核,且与PEDV可能存在共定位情况;Real-Time PCR检测结果显示:瞬时表达野生型IFITM1不影响PEDV吸附,但IFITM1 C端结构域（CTD）突变体会抑制PEDV的吸附;此外,IFITM1 CTD突变体会削弱对PEDV增殖的抑制,且位于CTD的第113位到第117位的氨基酸残基（113QMLER117）对IFITM1抗病毒作用具有重要的影响。综上,本研究揭示了IFITM1在体外对PEDV的复制具有抑制作用,同时还分析了IFITM1 CTD的功能性残基,这些结果为阐明猪IFITM1抑制PEDV感染的作用机制奠定了理论基础。
其他文献
甜叶菊是甜菊糖的主要来源植物,在我国的种植面积及出口量已居世界第一,但传统的甜菊糖提取工艺产生了大量甜叶菊废渣,废渣的直接丢弃不仅污染环境,还造成异绿原酸等功能性成分的资源浪费。目前针对绿原酸开发的饲料添加剂已广泛应用于畜禽养殖行业,但针对异绿原酸开发的养殖投入品依然较少。异绿原酸与绿原酸结构相近,生物活性也类似,如抗氧化、抗菌、抗病毒等,是饲料添加剂产品开发的潜在资源。本文主要从原料来源、质量控
油冷式扁线电机由于其高功率密度和高转矩密度的特点，被广泛应用于新能源汽车中，成为当今研究的热点。然而其复杂的油路结构可能会使冷却油分配不平衡，致使电机出现局部温度过高问题，严重时会影响整车的安全运行。为研究分析油路结构对于电机温度的影响，以一台额定功率为225 kW的油冷式扁线电机为研究对象，首先根据电机主要参数建立电机的有限元模型，计算分析电机损耗。然后建立电机三维温度场计算模型，求解温度场仿真
背景:桦木酸（betulinic acid,BA）属于羽扇豆烷型五环三萜类化合物,广泛分布于自然界的多种植物中,具有抗炎、抗氧化应激、抗肿瘤等多种生物学活性。前期研究发现,BA调控环磷酰胺（cyclophosphamide,CYP）诱导的肠粘膜屏障功能障碍,抑制肠道细胞凋亡,对肠黏膜损伤起到保护作用。那么,BA是否对CYP诱导的肾脏损伤也有相同的保护作用?具体调控机制如何?迄今为止未见报道。目的:
随着人口老龄化趋势加剧发展,养老问题日益严重,我国现有的医养结合模式发展应对养老服务挑战效果仍不理想。分析国内外医养结合模式的发展现况,总结当前国内医养结合模式发展存在的关键问题,明确国内医养结合模式进一步发展的策略。以"医养结合/医养融合""发展模式""现况""问题""效果""评价"为中文检索词;以"integrated medical and elderly care/integrated m
目的 探讨脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4（FABP4）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、和肽素在肥胖型多囊卵巢综合征（PCOS）中的表达及与胰岛素抵抗的相关性。方法 选择2018年6月至2021年3月门头沟区医院收治的123例PCOS患者，根据体质量指数（BMI）将PCOS患者分为超重和肥胖组（BMI≥24.0 kg/m~2）71例和正常体质量组（BMI在18.5～＜24.0 kg/m~2）52例，
目的:近些年来肥胖、心血管疾病、糖尿病、非酒精性脂肪肝等慢性病的高发,慢性病已成为全球卫生面临的主要挑战。大量研究证实了慢性病的发生与膳食脂肪摄入量密切相关。本研究探讨在4种不同脂肪供能水平（15%、25%、35%、45%）的膳食模式下,小鼠生长性能、血糖调控、肝脏和肠道糖脂代谢相关基因的表达以及肠道菌群的差异,为居民日常膳食油脂的使用提供参考依据。方法:60只7w龄C57BL/6J雄性小鼠,普通
目的:口炎是在人类及家畜中均很常见的一种炎症性疾病,口炎的发生会造成家畜采食量下降,严重会影响家畜的生长发育状态,导致营养失衡及体型消瘦,给养殖户带来巨大的经济损失。血管生成素样蛋白（Angiopoienin-like protein,ANGPTLs）是一类与血管生成素结构相似的分泌性糖蛋白家族,近些年研究发现其成员ANGPTL2,ANGPTL4及ANGPTL7具有促炎作用。基于口炎是一类常见的炎
氨基酸类神经递质（AANTs）在动物体内经过一系列的合成、转化与消逝等过程,同生物胺类、肽类和其他类的神经递质相互作用,共同维持着动物体内兴奋性的动态平衡。鉴于这些神经递质在机体内的含量变化会影响其在生物基质中的相对平衡,而这种相对平衡又决定着神经元的兴奋性水平,可见测定神经递质的含量变化与脑部生理功能和病理变化息息相关,因此,有必要建立神经递质检测方法分析生物样品中的含量。目前,常用内源性AAN
目的 研究现阶段本地健康人群中肺结节的可能风险因素，以此构建列线图风险预测模型。方法 筛选安徽医科大学第二附属医院健康管理中心2022年11月至2022年12月行胸部CT检查的体检人群3631人。收集临床特征及实验室检查结果。利用单因素比较和多因素Logistic回归分析风险因素，并利用列线图建模。使用受试者工作特征（ROC）曲线和曲线下面积（AUC）评价模型。用Hosmer-Lemeshow拟合
猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一种高度传染性疾病,临床症状主要表现为严重腹泻、呕吐和脱水,新生仔猪感染后发病率和死亡率极高。2010年以来,G2型PEDV毒株在我国引起了PED的大规模爆发,免疫接种是防控PED的重要手段,但当前缺乏用于PED免疫监测的有