论文部分内容阅读
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是PRRS病毒(PRRSV)引起的以繁殖障碍和呼吸系统疾病为特征的一种急性传染病,是目前危害养猪业发展的最为重要传染病之一。猪感染PRRSV后可引起猪肺和胎盘组织严重的炎症反应,这是PRRSV引起感染猪呼吸与繁殖障碍的重要致病原因。已知PRRSV主要感染猪的巨噬细胞,特别是肺泡巨噬细胞(PAMs)。组织中的巨噬细胞在介导PRRSV侵染、增殖和炎性反应起重要作用。然而PRRSV感染巨噬细胞如何引起严重的组织炎性反应,目前尚不完全清楚。近十年来研究发现,由单核/巨噬细胞介导的组织炎性反应与炎性体(Inflammasome)的激活有关。炎性体是单核/巨噬细胞内由感受外来病原或细胞内危险信号的模式识别受体与caspase1组成的复合体,复合体中的caspase1可催化白细胞介素1β(IL-1β)前体和IL-18前体转变为成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外,IL-1β是介导组织炎症的重要细胞因子。PRRSV感染巨噬细胞是否通过激活炎性体,促进IL-1β的成熟与释放,进而引起组织严重的炎性反应,目前尚不清楚。因此,为了证明PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞是否激活巨噬细胞的炎性体,促进IL-1β的成熟与释放,进而引起组织严重的炎性反应。我们首先用PRRSV感染用脂多糖(LPS)刺激的肺泡巨噬细胞,测定感染后细胞培养基中IL-1β和IL-18的含量,结果表明,PRRSV感染均可明显提高LPS刺激的和未刺激的巨噬细胞IL-1β和IL-18释放量,表明PRRSV可引起猪肺和胎盘组织的炎症反应与PRRSV激活巨噬细胞炎性体有关。有研究报道,流感病毒编码的孔道蛋白M2可促进病毒粒子的释放和激活单核/巨噬细胞的炎性体,从而介导组织的炎性反应。由于PRRSV的囊膜蛋白E也是一个孔道蛋白,和病毒粒子的释放有关,因此我们推测PRRSV囊膜蛋白E与PRRSV激活肺泡巨噬细胞炎性体有关。为证明这一推测,我们首先利用mRNA介导法将体外合成的囊膜蛋白E的mRNA转染LPS刺激的巨噬细胞,结果表明转染囊膜蛋白EmRNA可大幅提高LPS刺激的巨噬细胞IL-1β释放,并呈剂量依赖性,证实PRRSV囊膜蛋白E可激活猪巨噬细胞炎性体。综上所述,PRRSV可激活巨噬细胞的炎性体,这一激活作用与其编码的囊膜蛋白E有关。这项研究不仅对探讨PRRSV引起组织炎症的发生机制及其致病机制有重要参考价值,同时对探讨PRRSV防治的靶位也有重要指导意义。