论文部分内容阅读
自从80年代初，Evans等发现小鼠胚胎干细胞以来，干细胞的研究越来越成为生物及医学领域内研究的热点。其研究技术及研究方向在不断突破和扩展。神经系统在机体中的重要作用及其在成体损伤后修复困难等因素使得神经干细胞研究在神经科学领域备受重视。神经干细胞研究的发展为人类神经疾病的临床治疗奠定了坚实的理论基础，也为中枢神经系统疾病的治疗开辟了新的途径。
本实验室的前期工作发现基因SHD11在神经干细胞和分化的神经细胞中表达差异显著。通过RT-PCR我们克隆到此基因，并经PCR去掉开放读框末端的终止密码子之后将其克隆到哺乳动物表达载体pEGFP-C1和蛋白表达载体pPICZαA。组织差异表达分析表明其在小鼠神经干细胞内的表达量最高，成体小鼠大脑皮层最低，肝脏与脾脏介于二者之间，表达量相当。通过转染将SHD11导入神经干细胞内到了表达，实验发现其在神经干细胞分化过程中抑制了细胞突起的形成，遂将SHD11导入巴斯德毕赤酵母表达系统并使其蛋白得到了表达与鉴定。
以上实验过程中意外发现一个片断P12，已对其进行了克隆和测序，发现其与SHD11两端的20个碱基相同。转化神经干细胞后发现其对细胞突起的形成有抑制作用，遂将其置于巴斯德毕赤酵母系统中进行了蛋白的表达与鉴定。本文首次研究了SHD11和P12片断对神经细胞突起形成的影响，为进一步研究神经干细胞的分化及开发基因工程药物打下了一定的基础。