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食品安全问题正在逐步地引起人们关注。为能真正确保普通消费者的食用安全，就得保证各种动物源性食品的质量，这对我国肉食品中动物源性成分的检测工作提出了新的挑战。当前我国动物源性食品检测中有多种问题，针对在动物源性成分检测工作中的需要，我们在兔线粒体DNA细胞色素C氧化酶Ⅲ基因的克隆以及PCR-mtDNA技术检测肉食品中兔源性成分的研究方面，做了大量工作。我们以兔肌肉组织的全DNA为模板，用设计合成的P1、P2作为引物，通过PCR-mtDNA技术，实验成功的克隆了兔线粒体DNA COⅢ基因。通过序列分析表明，兔线粒体DNA序列包括COⅢ基因的全序列784bp。该序列包含有一个起始密码子（ATG）、一个不完全终止密码子（T）还有3’端下游的ATPase6和5’端上游的tRNA-Gly。兔线粒体DNACOⅢ基因的成功克隆以及序列分析结果，为研究以PCR-mtDNA作为一种新技术，来检测肉食品当中兔源性成分奠定了理论基础。通过多种生物分析软件来分析线粒体DNA序列，然后，根据兔线粒体DNACOⅢ基因具有的特异性的特点，来设计特异性引物上游特异引物P3(22bp)，下游特异引物P4(22bp)，然后利用PCR-mtDNA方法来检测兔源性成分。用多种动物的肌肉组织DNA为模板进行PCR扩增反应、通过反复实验进行筛选。最后验证出以P3、P4作为引物，只能扩出兔DNA片段，无法扩出其它动物的DNA。说明，引物P3、P4具有特异性强以及稳定性好的特点；以P3、P4为特异性引物，通过PCR反应扩出兔DNA特异性片段，该片段大小为230bp。然后将PCR扩增产物送到生物公司进行测序。通过分析得出结论是与已经克隆的兔线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅲ基因同源性完全一致，证明引物P3、P4的准确性。以10%、2%、1%、0.02%、0.01%、0.002%、0.001%不同梯度的DNA含量的模板溶液进行PCR扩增，检测特异性引物P3、P4的灵敏度。实验结果分析表明，特异性引物P3、P4的灵敏度比较高，约为0.001%。本文建立了用PCR-mtDNA技术鉴别检测肉食品或饲料当中兔源性成分。该技术具有特异性强、灵敏度高、省时省力、检测速度快以及费用低等诸多特点，PCR-mtDNA技术可以作为检测肉食品及饲料当中兔源性成的常规方法。