【摘 要】
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肝癌相关抗原HAb18G是一种高度糖基化的膜蛋白分子。应用肝癌特异性单抗HAb18从人肝癌cDNA文库中筛选得到其相应cDNA序列,查询Genebank证实HAb18G氨基酸序列同CD147分子相同
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肝癌相关抗原HAb18G是一种高度糖基化的膜蛋白分子。应用肝癌特异性单抗HAb18从人肝癌cDNA文库中筛选得到其相应cDNA序列,查询Genebank证实HAb18G氨基酸序列同CD147分子相同。与基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）、Basigin、Nureothelin等同属CD147家族。以往研究表明,HAb18G/CD147可刺激成纤维细胞分泌较高水平的基质金属蛋白酶（MMPs）,降解基底膜和细胞间质。此外,HAb18G/CD147还是一个潜在的黏附分子,其可通过与integrin家族α3β1、α6β1形成蛋白复合物,进而参与细胞与细胞、细胞与基质的黏附。上述功能的发挥,很大程度上依赖于其胞外区片段（extracellular domain,ed）的表达及糖基化修饰作用。故HAb18G/CD147胞外区（HAb18Ged）是其主要功能区,亦为本实验所使用的免疫原。本研究旨在建立稳定分泌抗人HAb18Ged蛋白单抗的杂交瘤细胞株,获得纯化抗体,鉴定目的抗体的理化性质及特异性,并进一步研究抗体的体内外生物学功能。 本实验共分三部分。首先,以HAb18Ged免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术,融合并筛选分泌抗人HAb18Ged蛋白单抗的杂交瘤细胞株,制备腹水,采用离子交换层析法纯化该抗体。以RT-PCR法扩增单抗的轻、
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