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目的:观察普通针刺和电针刺激水沟、风府穴对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后前炎性因子表达及神经细胞凋亡的影响。
方法:雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、普通针刺组、电针组,除假手术组仅行椎板切除术外,其余各组均用MASCIS Impactor建立大鼠SCI模型,治疗组于术后30min及术后4h后进行针刺治疗,每次30min,在术后8h处死大鼠,采用实时荧光定量PCR法检测前炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA的表达情况;Western Blotting法检测IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白的表达情况;原位末端标记法(TUNEL)检测SCI后神经细胞凋亡情况,HE及NISSL染色观察组织细胞形态变化。
结果:
1.光镜下观察:模型组可见损伤区中央灰质区出现大片出血,细胞肿胀、尼氏体消失,可见大片组织脱落,并有大量单核或多核炎性细胞浸润;两治疗组均可见中央灰质区出血灶较小,组织脱落区域小,可见部分正常形态的尼氏体,脊髓损伤及周围区炎性细胞浸润减轻。
2.光镜下观察:模型组可见大量凋亡细胞,灰质区多见,主要表现为胞浆减少,细胞核深染、固缩在一边。经治疗后两治疗组脊髓损伤细胞凋亡数量比模型组均高。SCI后8h,模型组中TUNEL阳性细胞数比假手术组高(P<0.05);与模型组比较,两治疗组大鼠受损伤的脊髓组织中TUNEL阳性细胞数比模型组均低(P<0.05)。电针组脊髓组织中TUNEL阳性细胞数比普通针刺组低(P<0.05)。
3.SCI后8h,与假手术组比较,模型组受损伤的脊髓组织中前炎性因子mRNA及蛋白表达水平比假手术组明显高(P<0.01);与模型组比较,两治疗组受损伤的脊髓组织中前炎性因子mRNA及蛋白表达水平比模型组均低(P<0.05)。电针组脊髓组织中前炎性因子mRNA及蛋白表达水平比普通针刺组低(P<0.05)。
结论:
1.用MASCIS Impactor制作大鼠脊髓损伤模型,质量可靠,操作易于控制和掌握。
2.刺激水沟、风府穴均抑制大鼠急性脊髓损伤后TNF-α、IL-1β、IL-6等前性因子表达,从而减轻脊髓损伤后的炎症反应,发挥对急性脊髓损伤的治疗作用。
3.刺激水沟、风府穴均减轻损伤脊髓组织病理学改变,抑制脊髓损伤后细胞凋亡,从而发挥对急性脊髓损伤后神经保护作用。
4.电针水沟、风府穴对急性脊髓损伤后神经保护作用较普通针刺组明显。