【摘 要】
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目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在男性各种癌症中居第三位,女性第二位。目前对于高侵袭性CRC仍然缺乏有效治疗手段,因此寻找CRC侵袭转移相关标志物对于开发新型治疗手段具有重要意义。肌动蛋白样蛋白8(actin-like protein,ACTL8)是癌症/睾丸(cancer/testis,CT)抗原的成员,但很少有关于ACTL8在恶性
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目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在男性各种癌症中居第三位,女性第二位。目前对于高侵袭性CRC仍然缺乏有效治疗手段,因此寻找CRC侵袭转移相关标志物对于开发新型治疗手段具有重要意义。肌动蛋白样蛋白8(actin-like protein,ACTL8)是癌症/睾丸(cancer/testis,CT)抗原的成员,但很少有关于ACTL8在恶性肿瘤中的作用的研究。本研究旨在探讨ACTL8蛋白在CRC中的表达与临床意义及作用机制。方法:通过大数据GEPIA数据库分析ACTL8的表达情况,收集人CRC组织和细胞系以及成对的相邻非肿瘤组织和人肠上皮细胞系,用免疫组化和western blot实验以评估ACTL8的表达。ROC确定ACTL8高低表达的界值,分析ACTL8蛋白表达水平与CRC临床病理参数和预后的关系。在CRC细胞系HT29和SW620中沉默ACTL8后,通过伤口愈合实验和transwell实验研究ACTL8在结直肠癌侵袭和转移中的生物学功能。STRING和GCBI数据库寻找可能与ACTL8相关的蛋白,GEIPA数据库和TCGA数据库中筛选在CRC中高表达,并与ACTL8相关的关键蛋白。在CRC细胞系HT29和SW620中沉默ACTL8后,通过q RT-PCR和Western blot实验分析研究ACTL8的潜在靶基因。结果:大数据免疫组化发现ACTL8在人CRC组织中m RNA表达水平升高,免疫组化发现ACTL8在人CRC组织中蛋白表达上调,western blot发现ACTL8在人CRC细胞系HT29、HCT116、SW480和SW620中蛋白表达上调。ACTL8蛋白表达水平与CRC临床病理参数和预后的相关性分析,结果表明ACTL8的高表达与分化差,侵袭和转移,术后感染和预后不良呈正相关,与近切缘(PML)呈负相关。此外,伤口愈合实验和transwell实验证明ACTL8的沉默显著降低了HT29和SW620细胞的侵袭和转移能力。q RT-PCR和Western blot实验证明ACTL8的沉默显著降低CRC细胞系HT29和SW620中三联基序蛋白29(tripartite motif containing 29,TRIM29)的表达。结论:这些结果提示ACTL8在CRC的侵袭和转移中起关键作用,并导致了CRC的预后不良,TRIM29可能参与ACTL8介导的CRC预后不良的过程。
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