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目的:1.探寻经皮肾镜术(PNL)后尿脓毒血症的高危因素,为预测尿脓毒血症提供依据。2.建立猪的肾盂灌注模型,通过抑制灌注液中HMGB1或加入重组HMGB1,分析HMGB1/TLR4在PNL引发的炎症反应中的作用,并抑制TLR4验证HMGB1通过TLR4信号通路参与PNL引发的炎症反应。3.建立猪的肾盂灌注模型,通过不同肾盂灌注流速,评估腔内灌注不同浓度维拉帕米对肾盂压力的影响,及其对全身系统有无副作用。方法:1.分析行PNL术患者293例,根据患者术后是否存在全身炎症反应综合征(SIRS)分为SIRS组和对照组。比较两组患者性别,年龄,糖尿病史,高血压史,结石相关发热史,患侧结石手术史,肾积水程度,结石大小,术前尿培养,尿白细胞,血白细胞计数,中性粒细胞比例,肌酐,C反应蛋白,降钙素原,白介素6,手术时间,结石残留等因素是否存在差异。2.建立肾盂灌注模型,分别用生理盐水,含HMGB1中和抗体的灌注液,含重组HMGB1的灌注液,在150 mm Hg压力下持续灌注30 min。q RT-PCR检测肾组织HMGB1m RNA水平表达;Western blot或免疫组化检测蛋白水平表达;q RT-PCR检测肾组织TLR4 m RNA水平表达,并采集血液用于血清炎性因子的检测。3.建立肾盂灌注模型,用不同灌注流速(0,2,4,6,8,10,14和20 ml/min)以及灌注不同浓度的维拉帕米(0,0.1,1,10和100 ug/ml)监测术中肾盂压力变化。结果:1.84名患者术后出现SIRS,女性患者(p=0.028),存在结石相关发热史(p<0.001),患侧结石手术史(p=0.029),结石体积大(p<0.001),术前尿培养阳性(p=0.041),尿白细胞阳性(p=0.007),血清C反应蛋白升高(p=0.011),降钙素原水平升高(p<0.001),手术时间长(p=0.044),存在结石残留(p=0.029)是PNL术后潜在尿脓毒血症的高危因素。其中结石相关发热病史(p<0.001),结石体积大(p<0.001)以及血清降钙素原水平升高(p=0.024)是PNL术后潜在尿脓毒血症的独立危险因素。2.肾盂灌注后,HMGB1蛋白表达和m RNA表达水平上升,TLR4表达增加;抑制HMGB1能够减轻灌注导致的炎性因子表达,并减少灌注导致的中性粒细胞和巨噬细胞浸润;而r HMGB1处理能促进灌注导致的炎性因子表达,并加重灌注导致的中性粒细胞和巨噬细胞浸润;抑制HMGB1可以抑制TLR4/My D88信号分子表达,而r HMGB1处理增强TLR4/My D88信号分子表达。3.用1,10和100 ug/ml浓度的维拉帕米灌注时能减少肾盂压力升高,且血压及心率均不受影响。而用0.1 ug/ml浓度的维拉帕米灌注时不能减少肾盂压力升高。结论:1.结石相关发热病史,结石体积大以及降钙素原水平升高是PNL术后潜在尿脓毒血症的独立危险因素。2.HMGB1/TLR4信号通路在PNL术后尿脓毒血症发生中起到了重要作用。3.腔内灌注维拉帕米能够显著降低肾盂压力,并且不会引起全身副作用。