人前列腺癌细胞特异性结合短肽的筛选及鉴定

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为了给针对人前列腺癌细胞不同位点的靶向药物设计提供实验依据,本研究以人前列腺癌细胞系PC3M细胞为靶细胞,人正常前列腺细胞及PC3细胞为吸附细胞对噬菌体7肽库进行差减筛选,得到多个人前列腺癌相关结合短肽和人前列腺癌高转移相关结合短肽。通过细胞ELISA实验、免疫细胞化学实验及DNA测序对其结构与功能进行了的鉴定;研究了其对于肿瘤细胞的生物学行为的影响;应用RT-PCR技术钓取人前列腺癌高转移相关结合短肽拟似的蛋白;应用WesternBlot方法回钓PC3M细胞表面与人前列腺癌高转移相关结合短肽结合蛋白质的大小及分布。结论如下:差减筛选获得8个人前列腺癌相关结合短肽和14个人前列腺癌高转移相关结合短肽,其均具有对PC3M细胞的高效率的靶向性;人前列腺癌高转移相关结合短肽可能在结构和功能上拟似了人体内自然状态下存在的含有SPTWSFL序列的未命名蛋白质和APLP2蛋白;通过蛋白回钓得到PC3M细胞表面和人前列腺癌高转移相关结合短肽结合的分子量为32.5KD蛋白片断;人前列腺癌相关结合短肽中的CCS1021和CCS1026克隆短肽能够抑制PC3M细胞的铺展、迁移和侵袭能力。
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