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目的:探讨人激肽释放酶1(Human Kallikrein-1,hKLK1)在大鼠过表达能否选择性调节心脏中巨噬细胞极化水平、延缓心脏衰老。方法:在体水平,将野生型SD鼠(WT)、激肽释放酶-1过表达大鼠(Tg)在SPF级条件下分别饲养至3月龄,24月龄。(1)通过测量血压、超声心动图比较各组大鼠的血流动力学、心功能;(2)通过β-半乳糖苷酶染色(β-gal)评价心肌细胞衰老程度,通过HE染色、WGA染色评价大鼠心肌的面积大小,通过Masson染色和天狼猩红染色评价各组大鼠心肌间质、管周纤维化的程度;(3)通过透射电镜观察h KLK1过表达对线粒体老化的影响,通过Western blot检测衰老标记蛋白p21,p53与线粒体生物合成及更新标记过氧化物增殖活化受体共刺激因子(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC-1α)的表达水平;(4)通过DHE染色研究各组大鼠心肌组织的ROS累积;通过Western blot研究各组心脏组织中NAPDH氧化酶亚基p47-phox、p-67-phox、gp91-phox及抗氧化酶SOD1与SOD2的表达。(5)通过免疫组化检测各组大鼠心肌组织TGF-β、单核细胞趋化因子MCP-1的表达水平,Western blot检测TGF-β,Ⅰ型胶原纤维(COLⅠ),基质金属蛋白酶抑制剂TIMP1及纤维化相关信号通路p-Smad3/Smad3的表达水平。(7)通过免疫组织化学检测各组心肌总巨噬细胞标记CD68含量,通过免疫荧光双抗体(CD68+CD163)标记检测M2型巨噬细胞渗入水平;通过Western blot检测相关信号分子p-Stat1/Stat1,p-Stat3/Stat3的含量;在细胞水平,用不同剂量过氧化氢协同IL-4诱导Raw264.7巨噬细胞系老化,用流式细胞仪检测其M1、M2的含量。通过Transwell小室检测Raw264.7在过氧化氢诱导下,用缓激肽(BK)及其受体阻断剂HOE-140处理后,检测其迁移能力。结果:在动物水平,年轻组Tg-3M与WT-3M相比,心功能及各项指标差异不明显;转基因老化组(Tg-24M)较WT-24M组相比,心脏舒张功障碍明显减轻,老化相关指标p21,p53表达较低,β-gal染色阳性细胞显著减少;心脏纤维化病变面积显著减少,线粒体结构紊乱和水肿得到明显改善,PGC-1α表达升高,抗氧化酶SOD1(Zn Cu-SOD)、SOD2(Mn-SOD)表达回升,p47-phox、p67-phox、gp91-phox表达减少;总巨噬细胞标记CD68降低,M2型巨噬细胞标记(CD163)表达增高,M2型巨噬细胞极化调节信号分子p-Stat3表达增高。在细胞水平,Raw264.7细胞系在IL-4诱导分化前用过氧化氢预处理,向M2型巨噬细胞极化的比例明显增高;用H2O2诱导Raw264.7,其趋化迁移能力明显增强,缓激肽干预明显降低其迁移水平,用缓激肽受体阻断剂HOE-140处理,其迁移能力再次回升增强。结论:在体水平大鼠内表达人激肽释放酶-1,通过调节p53-PGC-1α轴诱导的线粒体损伤及心脏氧化应激水平,下调巨噬细胞浸润水平及极化水平;下调p-Stat3诱导的M2型巨噬细胞的渗入,从而抑制TGF-β/p-Smad3诱导的心脏纤维化,延缓心脏衰老。在体外水平缓激肽能减少H2O2诱导的巨噬细胞迁移。