5-羟色胺和切眼柄对日本囊对虾卵巢协同促熟效应的研究

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本研究从生殖生态学角度,结合生产实践,采用实验生态学、形态学、组织学、海水养殖学和组织离体培养等多学科的方法和技术,以亲虾GSI,卵巢成熟率,手术效应期,产卵次数,产卵时间间隔,产卵量,受精率,孵化率,无节幼体数,卵径和无节幼体体长等11项生殖性能参数评价促熟的效果,研究了5-羟色胺(5-HT)和切眼柄对日本囊对虾亲虾分别的促熟效果和它们之间的协同促熟效应,以及5-HT促熟的生殖内分泌调控机制,以期丰富海产虾蟹生殖生态学基础资料,为日本囊对虾无节幼体的繁育生产提供更安全、可靠和高效的促熟新技术。主要结果如下:1、(1)亲虾注射两种剂量15ug/g和50ug/g5-HT均显促熟增效(P<0.05),其中主要参数产卵量分别增加57.26%和85.22%,无节幼体产量分别增加64.02%和102.53%,相比之下,50ug/g5-HT的促熟效果明显优于(P<0.05)15ug/g5-HT。同时以50ug/g5-HT剂量为基础,注射次数分1次、2次和3次,研究结果显示随着注射次数的增加产卵量、无节幼体产量和受精率均呈正相关关系(P<0.05),注射3次效果最佳,重复(多次)产卵次数达5次,产卵量和无节幼体产量提高104%和103%,而孵化率略呈负相关关系。(2)通过药饵途径两种含量15ug/g和50ug/g5-HT对亲虾促熟具有增效效应,尤以50ug/g5-HT药饵的促熟效果更佳(P<0.05),产卵量提高101.97%,无节幼体产量提高188.19%。在不同用药次数的情况下,产卵量、受精率、孵化率和无节幼体产量均随着摄食药饵次数的增加而增加,呈正相关关系(P<0.05),峰值均出现在3次用药组。(3)5-HT通过药浴途径对亲虾促熟也具有增效作用,剂量15ug/g5-HT仅略显增效,剂量50ug/g5-HT的促熟效果显著(P<0.05):后者的产卵量提高107.91%,无节幼体产量提高103.86%。在不同用药次数的情况下,产卵量、受精率、和无节幼体产量均随着药浴次数的增加而增加,呈正相关关系(P<0.05),而孵化率略呈负相关关系,即略下降态势,峰值均出现在3次用药组。(4)注射法、药饵法、药浴法三种处理方式在相同条件下的促熟效果比较,剂量为50ug/g5-HT药饵法3次用药的促熟效果最佳,产卵量提高217.45%,达(69.49+4.12)万粒,无节幼体产量提高了268.31%,达(38.96±1.16)万尾;5-HT对亲虾促熟的最佳处理模式是:药饵法、剂量为50ug/g、用药3次。2、经切眼柄处理的雌亲虾,产卵时间提前106.00h,产卵的时间间隔缩短128.93h,产卵量增加159.78%,无节幼体产量增加192.72%,可见,切眼柄的促熟效果明显(P<0.05)。3、在相同实验条件下,与未切眼柄组相比,亲虾的产卵量和无节幼体产量,5-HT单因素组分别提高了202.06%和306.15%,切眼柄单因素组提高了168.50%和208.83%,切眼柄+5-HT双因素组分别提高了259.45%和368.25%,可见都具有显著的促熟作用(P<0.05)。同时,两单因素组之间的整体促熟效果也有一定的差异,5-HT组优于切眼柄组,但不显著(P>0.05),而双因素组的促熟效果比两单因素组的高值还要高,表明这两个单因素组合在一起时发生交互作用,产生协同促熟效应。4、经组织离体培养,卵巢组织单独没促熟效应;卵巢组织单加视神经节,或脑,或胸神经节,促熟效应不明显(P>0.05),卵巢组织+脑+视神经节,或卵巢组织+胸神经节+视神经节联合培养时有促进卵巢发育的作用,但效果不显著(P>0.05),只有卵巢组织+脑+胸神经节联合培养时,卵母细胞直径达到最大值(0.2665±0.047)mm,表明5-HT不是直接作用于卵巢组织,而是通过脑和胸神经节的神经内分泌活动,进而促进卵巢的发育。
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