【摘 要】
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本实验以树舌、云芝、黑木耳、银耳、榆耳、虫草、小刺猴头菌多糖为材料,利用真菌多糖还原性末端可以与活泼氨基发生偶联反应的特性,以罗丹明B为荧光染料对几种真菌多糖进行标
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本实验以树舌、云芝、黑木耳、银耳、榆耳、虫草、小刺猴头菌多糖为材料,利用真菌多糖还原性末端可以与活泼氨基发生偶联反应的特性,以罗丹明B为荧光染料对几种真菌多糖进行标记。实验研究的阶段性成果如下:(1)以罗丹明B为荧光染料对几种真菌多糖进行标记,得到荧光标记的几种真菌多糖,其中树舌粗多糖的标记效果较好。(2)通过比较几种真菌多糖与罗丹明B的结合效果,最后选择对树舌多糖的荧光标记进行进一步研究。(3)以罗丹明B为荧光染料对树舌多糖进行标记,并对其进行单因素实验,考察了反应时间、反应pH、反应温度三个因素对罗丹明B标记树舌多糖效果的影响。(4)以单因素实验的结果为基础,采用响应面法对影响标记效果的三个反应因素进行优化。最后通过Design-Expert8.05b软件分析,得出了罗丹明B标记树舌多糖的最优条件为:反应时间23.10h、反应温度25.83℃、反应pH5.23,预测标记后样品在λ552nm处的最大OD值为0.135。(5)通过MTT比色法,考察了荧光标记前后的树舌多糖对SWWC1116细胞抑制率的影响。结果表明荧光标记对树舌多糖抑制SWWC1116的效果几乎没有影响。
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