白子菜对HepG2细胞(人肝癌细胞株)胰岛素抵抗的影响及其机制研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bigfishing
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:以白子菜提取物为研究对象,采用HepG2细胞,运用现代药理学研究方法,探讨白子菜对胰岛素抵抗的影响及其机制。  方法:用葡萄糖临床检测试剂盒检测白子菜对正常HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测HepG2细胞的增殖;采用高胰岛素诱导方法,通过优化胰岛素浓度和胰岛素作用时间建立适宜的高浓度胰岛素诱发的细胞胰岛素抵抗模型;用葡萄糖临床检测试剂盒检测白子菜对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;药物作用结束后收集细胞,细胞裂解液作用20min,于离心机上12000rp,4℃离心15min,取上清液分别采用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法、钼酸铵定磷法及蒽酮法测定胰岛素抵抗HepG2细胞内葡萄糖激酶(GK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性和糖原含量。  结果:在含葡萄糖浓度为10.0mmol/L的DMEM培养基中,白子菜可促进正常HepG2细胞的葡萄糖消耗,作用最强为浓度1.0mg/mL;白子菜对HepG2细胞增殖无影响;将HepG2细胞臵于10-8mol/L的胰岛素中36h,HepG2细胞对胰岛素的作用产生抵抗;将细胞臵于不含胰岛素的培养基中48h,发现HepG2胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗仍明显低于对照细胞,表明HepG2胰岛素抵抗细胞模型在48h内维持对胰岛素产生抗性的特征;白子菜能够促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,作用最强为浓度1.0mg/mL;白子菜可降低胰岛素抵抗HepG2细胞内葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的活性,增强葡萄糖激酶的活性和增加糖原含量,改善HepG2细胞胰岛素抵抗的状态。  结论:白子菜可促进正常 HepG2细胞的葡萄糖消耗;白子菜对HepG2细胞增殖无影响;运用高胰岛素诱导培养法可以复制出稳定可靠的胰岛素抵抗HepG2细胞模型,HepG2胰岛素抵抗细胞模型在48h内维持对胰岛素产生抗性的特征;白子菜可明显地促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗;白子菜可降低葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的活性,抑制胰岛素抵抗HepG2细胞的糖异生作用,从而减少细胞内源性葡萄糖的产生;增强葡萄糖激酶的活性,加快糖酵解的进行,增加胰岛素抵抗HepG2细胞的糖原含量,因此能够显著减轻胰岛素抵抗的状态。
其他文献
目的:针对磷酸氯喹应用于类风湿性关节炎的治疗,建立磷酸氯喹以及磷酸氯喹脂质体载药量、包封率的分析、测定方法,制备磷酸氯喹脂质体,筛选磷酸氯喹脂质体的制备工艺与处方。利用
学位
土贝母泡腾片为治疗宫颈糜烂的现代中药复方制剂,有土贝母、黄连、蛇床子、血竭四位中药组成。本论文在中医整体观念、辨证施治的理论指导下,根据临床用药特点和药物有效部位的
目的:1949-1979年是我国中医药发展史上重要的三十年,期间经历了二次全国性的中药资源普查及毛主席的“六.二六”指示,极大的促进了中草药事业的发展,并总结出版了大量的相关出