马钱子作为传统中药之一,具有良好的镇痛、抗炎效果,对风湿性及类风湿性关节炎、肩周炎、良性关节痛、腰及四肢关节扭伤、挫伤、带状疱疹、癌症晚期疼痛等均有良好疗效。现代研究表明：马钱子主要含有生物碱、苷类、萜类、有机酸等成分,其中生物碱是主要有效成分和有毒成分,约占2-5%左右,在生物碱中马钱子碱作为主要成分之一,具有很强的镇痛抗炎等药理活性,临床上常用于镇咳、祛痰、抑菌和抗肿瘤,而据文献报道另一主要成分士的宁几乎没有药理活性,是马钱子的主要毒性成分,因此考虑除去大部分士的宁后的优化马钱子总生物碱。但由于优化马钱子总生物碱还是存在部分毒性,阻碍了它的进一步推广应用。因此,考虑经皮给药制剂是其比较理想的给药剂型,可以在确保疗效的同时,显著降低它的毒性,使其更好地适用于临床。为此本文系统考察了优化马钱子总生物碱的制备工艺并对其经皮给药后的药效学实验进行了深入研究,具体内容包括马钱子总生物碱的提取纯化、优化马钱子总生物碱的制备、优化马钱子总生物碱基本透皮特性考察、优化前后两种总生物碱药效学和毒理学方面的主要差别比较等,为未来将优化马钱子总生物碱开发成一经皮给药新制剂奠定基础。采用正交法考察马钱子总生物碱提取工艺,实验结果表明：最佳提取工艺为：加70%乙醇,15倍量,回流提取3次,每次0.5 h。优化马钱子总生物碱的制备工艺为：取马钱子总生物碱粉末超声溶解于50%乙醇中,减压浓缩至原体积的0.08,浓缩液离心倒出上清液,置4℃冰箱静置过夜,离心,弃去沉淀,上清液置真空干燥箱干燥,精密称重,得优化马钱子总生物碱。实验结果表明,未优化前士的宁与马钱子碱占马钱子总生物碱的比例分别为52.42%和26.00%,而优化后分别占马钱子总生物碱的比例为22.99%和42.33%,优化前士的宁含量比马钱子碱含量为2：1,优化后为1：1.8,可见总生物碱中士的宁被除去了大部分,而主要有效成份马钱子碱损失很少,工艺较为合理。体外经皮吸收性质研究的实验结果表明：单独马钱子碱的透皮吸收速率为5.71μg/cm2/h,累积透过百分率为(59.41±2.90)%；优化马钱子总生物碱中马钱子碱透皮吸收速率为6.41μg·cm-2·h-1,累积透过百分率为(67.95±6.51)%,马钱子总生物碱中马钱子碱透皮吸收速率为9.11μg·cm-2·h-1,累积透过百分率为(73.52±11.22)%；因此各溶液中相同上样量的马钱子碱10 h皮肤累积透过量有差异,混合总生物碱溶液中的马钱子碱累积透过量高于单独马钱子碱溶液,累积透过百分率也有显著提高(P<0.05)；马钱子总碱溶液中士的宁的上样量是优化马钱子总碱溶液中士的宁上样量的3.1倍,士的宁10h皮肤累积透过量比为3.3倍,说明在总生物碱溶液中士的宁的透皮速率没有显著改变,提示士的宁可以显著促进马钱子碱的透皮吸收。本文比较了优化前后两种总生物碱经皮给药后的药效。二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎实验表明,优化马钱子总生物碱能抑制小鼠的耳肿胀,起到抗炎效果。其抗炎的有效剂量为6 mg·kg-1,而马钱子总生物碱没有此作用。本文采用迟发型超敏反应实验,比较了优化前后两种总生物碱经皮给药对小鼠免疫功能的影响。与空白组比较,优化马钱子总生物碱高剂量组12 mg·kg-1差异显著(p<0.01),但中剂量6 mg·kg-1与低剂量3 mg·kg-1优化马钱子总生物碱组与空白组比较无差异,同时,优化马钱子总生物碱对免疫器官的重量指数无明显影响,而马钱子总生物碱组无作用。提示短期给药,一定剂量的优化马钱子总生物碱有免疫抑制作用,但对免疫器官的重量无影响。镇痛实验结果表明,采用醋酸扭体法,可见优化马钱子总生碱有显著的镇痛效果,其镇痛的有效剂量为12mg·kg-1;采用热板法,优化马钱子总生物碱的有效剂量为12 mg·kg-1。而两个镇痛实验中马钱子总生物碱在12 mg·kg-1与空白组比较没有显著性差异,提示优化马钱子总生物碱的镇痛效果优于马钱子总生物碱。本文采用MTT法进行了优化前后两种总生物碱体外抗肿瘤的活性评价和筛选。结果表明,优化马钱子生物碱对各种肿瘤细胞的生长抑制作用均强于马钱子总生物碱,并且对肿瘤细胞毒性呈剂量依赖关系,尤其对人卵巢癌细胞A2780、人结肠癌细胞LoVo最为敏感,最高抑制率达到80%以上。另外,本文通过急性毒性实验比较了优化前后两种总生物碱的毒性,马钱子总生物碱的LD50为6.400 mg·kg-1,而除去部分士的宁的优化马钱子总生物碱的毒性显著降低,LD50为12.303 mg·kg-1,毒性降低近一半。