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研究背景：禽流感病毒毒力与宿主糖蛋白糖链结构密切相关,不同亚型在宿主中的糖链结构存在着较大差异,亚型相同源性不同毒株间糖链结构也有一定的差异。本研究主要分析禽流感病毒糖蛋白血凝素和神经氨酸酶的糖链结构与致病性、亚型以及源性的关系。方法：主要是利用凝集素芯片技术分析禽流感病毒糖蛋白糖链结构,在实验中,以昆虫细胞表达的HA和鸡胚培养的禽流感病毒糖蛋白为研究对象,主要是分析流感病毒毒力、亚型、源性与禽流感病毒表面糖蛋白糖链间的关系。将37种凝集素、空白对照、位置标记固定在环氧化片基上制备出凝集素芯片；用荧光染料Cy3标记样本,检测不同毒力、不同亚型禽流感病毒糖链结构的差异。结果：利用凝集素芯片技术分别检测克隆表达的HA和鸡胚培养的8种病毒样本糖链结构,分析病毒的毒力、亚型、源性与糖链结构之间的关系。实验结果显示：(1)表达的H5HA和H9HA重组蛋白中AAL、UEA-Ⅰ、BS-Ⅰ、PSA、PWM、GNA、VVA、MAL-Ⅰ均为阳性信号,我们发现昆虫表达的HA有岩藻糖化的修饰；其末端有GalNAc和α-mannose的糖基化修饰,但是H5HA和H9HA还是存在一定的差异,凝集素PHA-E+L在H5HA中是阳性信号,而在H9HA中是阴性信号,亚型(编码该蛋白的特异核苷酸序列)的差异导致表达后HA上糖链结构有细微的差异。(2)用鸡胚培养的亚型、毒力、源性不同的八种病毒,我们发现糖基化对流感病毒毒力、流感病毒结合宿主细胞受体都有影响；糖基化位点和糖链结构取决于甲型流感病毒的亚型和宿主细胞。以H5亚型为例：1.样本H5N1 (DK/GD/17/08)、H5N1 (CK/GX/4/09)都是高致病性、H5N1亚型,源性的差异导致凝集素DSA、PHA-E+L在样本H5N1 (CK/GX/4/09)中为阳性而在H5N1 (DK/GD/17/08)为阴性,凝集素SNA在H5N1 (DK/GD/17/08)中为阳性在H5N1 (CK/GX/4/09)中为阴性。表明样本H5N1 (DK/GD/17/08)中存在GlcNA, Galβ1-3GalNAcα-Ser/Thr(Tn), Sia2-6Galβ1-4Glc(NAc), Galβ1-3GalNAc,β-ga1，terminal GlcNAc, Bisecting GlcNAc and biantennaryN-glycans, branched and terminal mannose糖链结构；H5N1 (CK/GX/4/09)中存在GlcNA, Galβ1-3GalNAc, Bisecting GlcNAc and biantennary N-glycans and tetraantennary complex-type N-glycan, Galβl-3GalNAcα-Ser/Thr(Tn), Bisecting GlcNAc and biantennary N-glycans,β-gal, branched and terminal mannose,terminal GlcNAc糖链结构。2.高致病性样本H5N2 (Mallard/JX/16/05)、低致病性样本H5N2(Ostrich/Denmark/96-72420/96)亚型相同,但是致病性、源性有差异,结果显示凝集素ACA, SNA, PHA-E, RCA120, Con A, GNA在高致病性H5N2显示阳性,凝集素Con A, RCA120, PHA-E, DSA, STL在低致病性H5N2中显示阳性,高致病性样本H5N2 (Mallard/JX/16/05)中存在Terminalα-1,3 mannos, Sia2-6Galβ1-4Glc(NAc), Bisecting GlcNAc and biantennary N-glycans, Galβ1-3GalNAcα-Ser/Thr(Tn),β-gal, branched and terminal mannose, terminal GlcNAc糖链结构；低致病性H5N2 (Ostrich/Denmark/96-72420/96)中存在GlcNAc, Bisecting GlcNAc and biantennary N-glycans,β-gal, branched and terminal mannose, terminal GlcNAc糖链结构。结论：初步的研究结果显示禽流感病毒H5、H7和H9亚型糖蛋白糖链结构与其致病性和亚型之间存在密切的相关性,与其源性有一定的关系。利用凝集素芯片技术通过对其糖蛋白糖链结构的分析就可确定它们的亚型以及毒力强弱。本研究的发现为监测流感大流行提供了一定的技术和理论依据。