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目的:
1、筛选出MSCs迁移入外周血可能相关的因子,测量大鼠烫伤后不同时间点的血清中IL-8含量的变化,统计是否具有差异性。
2、初步探索IL-8对MSCs迁移入外周血对损伤组织进行修复的作用。观察IL-8对MSCs的迁移能力的影响,并计算出迁移率。
方法:
1、建立大鼠皮肤创伤模型,抽取创伤前后不同时间点的血液,分离血清,利用ELISA方法比较分析血清成分中IL-8的变化。
2、分离,培养扩增大鼠的骨髓间充质干细胞,留取第三代备用。制备趋化实验模型,在培养基中加入不同浓度的IL-8制备成浓度梯度进行培养。不同时间点观察细胞迁移,利用细胞计数板检测迁移的细胞数量。
3、利用SPSS统计学软件加以分析,得出结论。
结果:
1、烫伤后2h时血清中IL-8含量有所升高,烫伤后8小时,血清中的IL-8的含量达到最高,烫伤后24小时较8小时组略有下降。其中8小时和24小时组血清中IL-8的含量与对照组有显著性差异(P<0.05)。烫伤后30分、1h、2h、3天及7天时血清中IL-8的含量与对照组无显著性差异。
2、一定浓度的IL-8对于大鼠MSCs迁移到外周血有着诱导的作用。IL-8的作用时间越长,MSCs的IL-8作用后第24小时与48小时迁移作用发生的最为明显。其中在IL-8浓度为100ng/ml时迁移率达到最高,超过30%的MSCs细胞发生了迁移。
结论:
1、大鼠烫伤后血清中的IL-8的含量有改变,在烫伤后8小时和24小时大鼠血清中的IL-8含量与对照组差异显著。
2、本实验表明,一定浓度的IL-8对于大鼠MSCs迁移到外周血修复损伤组织有着诱导的作用,并为我们进一步研究MSCs归巢到损伤部位并参与创伤修复提供了思路,为临床利用自体干细胞进行创伤修复提供了实验基础。