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目的:研究重组hAG(K1～3)基因在真核细胞中的表达情况,并检测其体外对胃癌细胞及血管内皮细胞的生长抑制情况,探讨hAG抑制肿瘤生长的原理,研究hAG(K1~3)联合TRAIL在体内对裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长抑制情况,为研究hAG联合多基因在肿瘤的基因治疗方面的应用奠定基础。方法:(1)从人肝脏组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法获得hAG(K1～3)基因,将其克隆到真核荧光表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-hAG;(2)将重组质粒转染COS-7细胞,通过报告基因荧光蛋白的表达、RT-PCR和Western blot检测其融合蛋白在真核细胞中的表达;(3)将重组质粒pEGFP-N1- hAG通过脂质体转染处于对数生长期的人胃癌细胞及人脐静脉内皮细胞,MTT法分析hAG(K1~3)基因对两种细胞体外增殖的抑制率;(4)通过亚克隆法构建重组质粒pBud-hAG及pBud-hAG-TRAIL,将人胃癌细胞SGC-7901注射裸鼠皮下形成移植瘤,然后将两种质粒分别分次多点注入瘤体内,研究其对肿瘤生长抑制情况及对肿瘤血管密度的影响。结果:(1)通过RT-PCR方法克隆得到hAG(K1～3)基因片断,长度为836bp,与目的基因片段大小相一致;(2)重组质粒pEGFP-N1- hAG构建成功,hAG(K1～3)在真核细胞中表达,并与荧光蛋白融合;(3)hAG(K1~3)对人脐静脉内皮细胞的体外增值有明显的抑制作用(P<0.05),但对胃癌细胞无此作用;(4)hAG(K1～3)在体内对肿瘤血管有明显抑制作用,hAG(K1～3)联合TRAIL基因可明显抑制肿瘤的生长。结论:hAG(K1～3)通过抑制血管内皮细胞的生长而抑制肿瘤血管的生成,从而抑制肿瘤生长,对肿瘤细胞本身没有明显的抑制作用。hAG(K1～3)联合TRAIL有更强的抗肿瘤作用。