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研究背景和目的结直肠癌（Colorectalcarcinoma,CRC）是世界第二大癌症死亡原因,在中国也呈上升趋势,导致患者死亡的主要原因是复发和转移。抗PD-1/PD-L1（Programmed cell death 1/Programmed cell death 1 ligand 1）.的免疫治疗是近年来肿瘤治疗的重大突破之一,已被 NCCN（National Comprehensive Cancer Network）指南推荐应用于 dMMR（Defective Mismatch Repair）或 MSI-H（High-frequency Microsatellite Instability）的转移性或难治性CRC患者。目前PD-1/PD-L1抑制剂对含有dMMR或者MSI-H突变的晚期CRC患者（仅占5%）的有效率为40-60%,因此更加精确的寻找适宜人群,进一步提高免疫治疗的疗效,成为免疫治疗中急需解决的问题。人类趋化因子 CMTM6（CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing6）是PD-L1的关键调控因子,它通过抑制PD-L1的泛素化,从而增加了 PD-L1的稳定性。最近研究表明,在接受免疫治疗的非小细胞肺癌患者中CMTM6和PD-L1的共表达与较长的总体生存期显著相关,可能使患者从阻止PD-1轴中获得收益。本研究通过探讨CMTM6、PD-L1和肿瘤微环境免疫细胞在CRC dMMR组和pMMR（Proficient Mismatch Repair）组的表达相关性及其临床病理意义;利用PD-1/PD-L1抑制剂治疗有效或无效的CRC队列,探讨CMTM6是否能作为一个免疫治疗关键的预测因子。研究方法收集南方医院病理科从2015年1月至2017年12月手术切除的结直肠癌1,328例,采用免疫组化检测肿瘤组织中错配修复蛋白（MLH1、MSH2、MSH6和PMS2）的表达以确定dMMR CRC。采用免疫组化分析CMTM6、PD-L1和肿瘤微环境中间质细胞（CD4、CD8、CD68、CD163和a-SMA）在CRC dMMR组（n=121）和pMMR组（n=127）的表达相关性及预后情况。收集南方医院、珠江医院和南部战区总医院32例接受PD-1/PD-L1抑制剂（Pembrolizumab,Nivolumab,Camrelizumab,Sintilimab 和 Toripalimab）治疗的晚期难治性/转移性CRC患者（dMMR6例,pMMR26例）,参考免疫疗法试验中使用的反应标准指南（immunotherapy response evaluation criteria in solid tumor,iRECIST）将其分为治疗有效组（6例）和无效组（26例）。采用多重免疫荧光检测 CMTM6、PD-L1、CD4、CD8、CD68 和 CD163 在 32 例 CRC 肿瘤组织中的表达及定位,分析CMTM6表达及定位对CRC PD-1/PD-L1抑制剂治疗的预测作用。研究结果1、CMTM6和PD-L1在CRC dMMR组中的表达明显高于pMMR组（P<0.001和P=0.002）,两者在CRC中表达呈正相关（R=0.456,P<0.001）,尤其在dMMR组中CMTM6和PD-L1的表达呈高度正相关（R=0.714,P<0.001）;肿瘤浸润淋巴细胞（CD4+和CD8+）及肿瘤相关巨噬细胞（CD68+和CD163+）在dMMR组中的数量较pMMR组明显增多（P值分别为<0.001、<0.001、=0.001和<0.001）。在dMMR组结直肠癌中的CMTM6的表达与CD68+的巨噬细胞具有正相关（R=0.222,P=0.015）,尤其是与CD163+的M2型巨噬细胞的表达具有正相关（R=0.292,P=0.001）,而在pMMR组中均无相关性。2、CMTM6和PD-L1在结直肠癌中的表达高低与结直肠癌患者预后无关,提示CMTM6或者PD-L1并不是一个预后指标;CD4+和CD8+的T淋巴细胞越多提示更好的预后（p<0.001和p=0.005）。3、32例难治性/转移性结直肠癌患者中免疫治疗有效率总体较低,占比18.8%（6/32）,在dMMR组和pMMR组结直肠癌患者治疗有效率分别为33.3%（2/6）和 15.4%（4/26）。CMTM6/PD-L1、CMTM6/CD8+细胞和 CMTM6/CD163+细胞的共表达在治疗有效组和治疗无效组之间具有显著性差异（p=0.006,p=0.012和p=0.001）,3组共表达在32例CRC免疫治疗患者中的治疗有效率分别为50.0%（5/10）、57.1%（4/7）和 71.4%（5/7）;在 6例 CRC dMMR组免疫治疗患者中的有效率分别为 50%（2/4）、66.7%（2/3）和 66.7%（2/3）;在 26 例 CRC pMMR组免疫治疗患者中的有效率分别为50.0%（3/6）、50.0%（2/4）和75.0%（3/4）。以上结果表明CMTM6与CD163的联合检测对于预测免疫治疗的反应性最佳,在CRC患者中其预测免疫治疗有效率为71.4%,在dMMR组和pMMR组中预测治疗有效率分别为66.7%和75.0%。结论1、CMTM6和PD-L1在结直肠癌中的表达与结直肠癌患者预后无关,CD4+和CD8+的T淋巴细胞检测有助于判断患者预后;2、CMTM6与CD163的联合检测比单独使用dMMR作为CRC免疫治疗的标志物更加精准,可作为判断PD-1/PD-L1治疗CRC疗效的参考。