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第一部分高毒力肺炎克雷伯菌在呼吸系统感染患者的临床特征目的:通过收集并鉴定广西医科大学第一附属医院临床分离的高毒力肺炎克雷伯菌（hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP）,分析呼吸系统感染hvKP患者的临床特征,以便对hvKP感染的临床诊断和治疗提供理论指导。方法:收集广西医科大学第一附属医院2019年1月至2021年1月期间临床分离的呼吸系统感染的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）86株,所有菌株均通过全自动快速微生物质谱仪鉴定及VITEK-2 Compact系统进行药敏试验。通过黏液拉丝试验阳性,初步将肺炎克雷伯菌分为hvKP观察组和经典肺炎克雷伯菌（Classic Klebsiella pneumoniae,cKP）对照组。对hvKP感染患者的临床资料进行分析,以明确hvKP感染的危险因素、临床特征。结果:86株临床分离的呼吸感染的KP中,黏液拉丝试验阳性42（42/86,48.84%）株,阴性44（44/86,51.16%）株;痰标本来源63株,占72.26%,灌洗液来源23株,占27.74%;KP在重症监护室检出率最高,为32.56%,其中hvKP占20.93%,cKP占11.63%。与cKP对照组对比,hvKP观察组中,住院时间（30.80±21.89天）显著延长（P＜0.01）;与cKP对照组对比,hvKP观察组中,医院获得性肺炎（30/42,71.43%）（P＜0.05）,感染性休克（11/42,26.19%）（P＜0.05）、重症肺炎（19/42,45.24%）（P＜0.05）、入住ICU（23/42,54.76%）（P＜0.05）、机械通气（19/42,45.24%）（P＜0.05）、气管插管或切开（19/42,45.24%）（P＜0.05）、合并真菌感染（21/42,50.00%）（P＜0.05）的发生率均明显增高。与cKP对照组对比,hvKP观察组中,合并糖尿病（18/42,42.86%）（P＜0.05）或恶性肿瘤（12/42,28.57%）（P＜0.05）、外科术后1周内合并感染（17/42,40.48%）（P＜0.05）、出现低蛋白血症（11/42,26.19%）（P＜0.05）的发生率均明显增高。与cKP相比,hvKP对阿莫西林/棒酸、头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑啉、庆大霉素、左旋氧氟沙星、哌拉西林、复方新诺明耐药率低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。此外,86株临床分离的呼吸系统感染的KP中,22株（22/86,25.58%）产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumβ-Lactamase,ESBLs）,其中cKP菌株产ESBLs的比例显著高于hvKP菌株（38.64%与11.90%,P＜0.01）。与cKP相比,hvKP易产生全身侵袭性感染。结论:hvKP观察组患者住院时间、医院获得性肺炎、感染性休克、重症肺炎、入住ICU、机械通气、气管插管或气管切开、合并真菌感染的发生率均显著高于cKP对照组;hvKP观察组患者合并糖尿病、恶性肿瘤、外科术后1周内合并感染、低蛋白血症的发生率显著高于cKP对照组。hvKP对临床常用抗生素的耐药率较cKP低,hvKP产ESBLs比例显著低于cKP此外,hvKP易产生全身侵袭性感染。第二部分hvKP与cKP在呼吸系统感染中生物被膜、荚膜血清型和毒力基因的分布特点目的:探索呼吸系统感染hvKP与cKP生物被膜、荚膜血清型和毒力基因的分布特点。方法:第一部分中收集并鉴定的临床分离的86株KP,通过黏液拉丝试验阳性,分为hvKP观察组（42株）和cKP对照组（44株）。利用结晶紫染色法测定hvKP观察组和cKP对照组生物被膜形成能力;通过扫描电子显微镜（Scanning electron microscopy,SEM）观察两组中生物被膜三维立体结构形成情况。采用PCR检测KP的6种荚膜血清型:K1,K2,K5,K20,K54和K57在两组中的分布特征,并检测KP的9种毒力基因aero,rmpA,rmpA2,magA,fimH,iucA,iutA,iroB,PEG-344在两组中的分布特征;通过实时荧光定量PCR（qPCR）检测生物被膜内KP菌株的rmpA基因在两组中的表达情况。结果:86株临床分离的KP菌株中,60株（69.77%）生物被膜形成阳性菌株,其中hvKP观察组中有36株,cKP对照组中有24株,hvKP观察组（36/42,85.71%）和cKP对照组（24/44,54.54%）两组生物被膜阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。hvKP观察组和cKP对照组两组中,SEM均可见生物被膜三维立体结构,与cKP对照组相比,hvKP观察组形成的生物被膜胞外基质更粘稠、浓密,膜内KP菌落聚集、黏附更紧密。PCR法检测荚膜血清K2型在hvKP观察组中表达较cKP对照组高,差异具有统计学意义（P＜0.01）。PCR法检测,hvKP观察组中毒力基因阳性率最高的前3种为rmpA、iutA、PEG-344,分别为78.57%、73.81%、71.43%。与cKP感染组相比,hvKP观察组rmpA,rmpA2,PEG-344,iutA和iucA基因表达高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。qPCR法检测rmpA基因在cKP组和hvKP组中的表达差异具有统计学意义（P＜0.05）,且hvKP组的rmpA基因表达量高于cKP组的表达量。结论:临床分离的hvKP比cKP生物被膜形成能力更强;荚膜血清型K2是临床分离的cKP和hvKP的主要血清型,而hvKP组K2表达较cKP组高;rmpA,iutA,PEG-344,rmpA2和iucA基因在hvKP中均高表达,且较cKP组高;hvKP组患者病情重,临床预后差,同时荚膜血清型K2型及毒力因子rmpA、PEG-344表达高,膜血清型K2及毒力基因rmpA,PEG-344可能与其感染后病情更重,容易发生侵袭性感染和预后差相关。