细胞核移植和胚胎分割是目前生产哺乳类克隆动物最重要的两种方法。细胞核移植是以早期胚胎细胞、胚胎干细胞或体细胞核作核供体,移入去核的卵母细胞中,使供体核在受体胞质中去分化,启动重构胚发育程序的过程。体细胞核移植研究不仅是发育生物学中一个极为重要的理论问题,而且是动物繁殖、人类治疗性克隆中的重要应用课题。该项研究目前尚处于初始阶段,其中许多理论问题尚不明确,技术程序很不成熟,是目前各国学者竞相突破的焦点问题。胚胎分割即分割2-细胞期至囊胚期不同阶段胚胎,产生同卵孪生或多生后代的克隆方法。对于小鼠来说,植入前胚胎分割成功率及胚胎分割后的发育率均较低,其影响因素尚需研究和探索。为此我们对动物克隆中体细胞核移植和胚胎分割中几个关键环节及其影响因素进行了较为系统和深入的研究。 一、动情周期时相对小鼠超排卵母细胞质量和孤雌激活后体外发育的影响 体细胞核移植中,卵母细胞作为胞质受体,其数量和质量直接影响体细胞核移植的整体效果。以往研究证实,地鼠、大鼠及其他家畜动物的诱导超排卵实验中,动情周期对超排效果均具有重要影响,但在小鼠的超排诱导实验中,人们却一直忽略了动情周期的影响。我们用孕马血清促性腺激素作为外源生殖激素对处于动情前期、动情期、动情后期及间情期小鼠进行超排卵诱导,收集并计算形态正常卵母细胞比率,并将正常卵母细胞用SrCl₂孤雌激活后体外培养,探讨动情周期时相对小鼠超排卵母细胞质量和孤雌激活后体外发育的影响。结果显示,动情前期和动情期注射组获得的形态正常卵母