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目的:为了掌握不同地区冬凌草的品质,明确不同地区冬凌草有效成份含量及遗传基因的差异,准确对冬凌草进行品质评价,为冬凌草资源的保护、科学开发和合理利用提供科学依据。
方法:通过 HPLC 法对不同地区的冬凌草的有效化学成分进行含量测定;通过RAPD(随机扩增多态性DNA)分子标记探讨不同地区冬凌草的遗传分化关系。
结果:1、不同地区冬凌草有效成分品质评价
通过HPLC法测定对不同地区冬凌草中有效成分冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸含量,热浸法测定指标性成份醇溶性浸出物含量。各化学成分含量测定的结果输入统计计算软件SPSS17.0进行聚类分析及主成分分析。聚类分析结果显示,不同地区冬凌草有效成分差异明显,表现为品质差异与地理隔离不成比例,地理分布相近的冬凌草品质差别很大,而有些地理分布远的冬凌草可能由于生长环境相似,差别反而小。主成分分析结果表明,河南与山西交界的太行山区南部品质排名较靠前,其中淇县、济源的最优。影响冬凌草品质的主要因素是冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。
2、不同地区随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记
提取冬凌草基因组DNA,并对RAPD-PCR反应条件进行优化,:通过利用48个 10bp 的随机引物对 31 份不同地区冬凌草种质资源材料 RAPD 分析, 探讨不同地区冬凌草之间的遗传分化关系。从中筛选出 10 条进行扩增,建立了冬凌草RAPD 指纹图谱,计算遗传距离,绘制遗传关系树状图。结果表明,不同地区冬凌草遗传分化较大,其中河南鲁山和山西夏县遗传距离最大。
结论:结合不同地区冬凌草品质的评价和 RAPD 分子标记的分析,可以明确不同产地冬凌草品质差别较大。为保护冬凌草资源、合理开发利用及其药材质量的综合评价提供科学依据。