东北山核桃壳黄酮氧化损伤保护作用研究

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本研究以东北山核桃壳为原料,提取黄酮,经大孔树脂纯化提高纯度,并通过体外、体内试验研究东北山核桃壳黄酮的氧化损伤保护作用。(1)通过超声波辅助提取、大孔树脂纯化得到东北山核桃壳黄酮,采用分光光度法进行清除ABTS自由基、DPPH自由基、羟自由基、还原铁离子能力的测定,研究体外抗氧化能力,结果表明:黄酮纯度为30%洗脱物>50%洗脱物>粗提物>70%洗脱物;30%洗脱物的清除ABTS自由基、DPPH自由基、羟自由基、还原铁离子能力强于其他梯度洗脱物,乙醇梯度洗脱物的抗氧化活性与黄酮纯度呈正相关。其中30%洗脱物抗氧化性最强,可用于后续体内抗氧化的深入研究。(2)建立辐射诱导氧化损伤模型,通过分光光度法测定照射24 h后,小鼠血清及肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活力以及MDA、GSH含量,结果表明:各组小鼠体重平稳增加,组间差异不显著,表明东北山核桃壳黄酮对小鼠一般生理状态没有明显影响。与模型组相比,东北山核桃壳黄酮各剂量组可不同程度地增加小鼠体内SOD、GSH-Px、CAT的活性和GSH的含量,降低MDA的含量,表明东北山核桃壳黄酮对氧化损伤小鼠抗氧化系统起到了保护作用。(3)建立辐射诱导氧化损伤模型,通过外周血细胞计数法、形态学法等研究照射14 d后东北山核桃壳黄酮对小鼠外周血象及肝脏、脾脏、肾脏等组织的影响,结果表明:东北山核桃壳黄酮增加了 RBC与HGB的含量,而对WBC含量影响不显著;能够改善氧化损伤小鼠脾脏和胸腺萎缩,提高脏器指数;能够使氧化损伤小鼠的肝组织细胞坏死、变性现象减少,减轻肾脏组织肾小球萎缩变形和减少肾小管中絮状物;能下调氧化损伤小鼠肝脏和脾脏细胞中Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白的表达,抑制肝脏和脾脏细胞的凋亡。表明东北山核桃壳黄酮对氧化损伤小鼠机体具有修复保护作用。
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