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基于基因在不同物种中的同源性设计引物,从紫花苜蓿中克隆出一段cDNA序列,经在NCBI上进行同源性比对和初步分析,推测该序列编码单脱氢抗坏血酸还原酶,标记为MsMDAR。该基因的编码区全长1302bp,推测编码434个氨基酸(Genebank登录号:JN979555)。将MsMDAR的完整开放阅读框(ORF)插入到原核表达载体pET-30a(+)中,构建融合表达载体pET-MDAR,然后转化大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,产物为带有His标签的融合蛋白。SDS-PAGE分析表